В огляді обговорені найбільш ймовірні генетичні механізми, які можуть лежати в основі утворення нових патогенних штамів V. cholerae з високим епідемічним потенціалом.

Анотація наукової статті з біологічних наук, автор наукової роботи - Єрошенко Г. А.


Vibrio cholerae O139: Genetics and Molecular Mechanisms of Origination of the Non-O1 Serogroup Cholera Pathogen

Discussed in the review are the most likely genetic mechanisms, that might underlie the formation of new pathogenic V. cholerae strains manifesting high epidemic potential.


Область наук:
  • біологічні науки
  • Рік видавництва: 2006
    Журнал: Проблеми особливо небезпечних інфекцій

    Текст наукової роботи на тему «Vibrio cholerae O139: генетика і молекулярні механізми утворення збудника холери не О1 серогрупи»

    ?УДК 616.932: 575

    Г.А.Ерошенко

    МВНО СІОЬЕВДЕ 0139: ГЕНЕТИКА І МОЛЕКУЛЯРНІ МЕХАНІЗМИ ОСВІТИ ЗБУДНИКА ХОЛЕРИ НЕ О1 серогрупи

    Російський науково-дослідний протичумний інститут «Мікроб»

    В огляді обговорені найбільш ймовірні генетичні механізми, які можуть лежати в основі утворення нових патогенних штамів V. ско1егае з високим епідемічним потенціалом.

    Ключові слова: збудник холери, молекулярні механізми утворення нових патогенних штамів.

    В даний час відомо 206 серогрупп холерних вібріонів, що відрізняються між собою за структурою соматичного О-антигену. Деякі з них здатні викликати різні діарейні захворювання у людини, але до недавнього часу вважалося, що епідемії холери можуть бути викликані тільки токсигенними холерним вібріоном О1 се-рогруппи. Однак в 1992-1993 рр. в Південно-Східній Азії з'явився «новий» збудник холери 0139 серогрупи, який став причиною великих епідемій з високим рівнем летальності серед населення і який згодом був визнаний другим етіологічним холерним агентом. Протягом більш ніж десяти років свого існування V. ско! Егае 0139 викликав спалаху холери різної інтенсивності, які і до цього дня часто реєструються в південній частині Індійського півострова [12, 22]. Поява V. ско1егае 0139 змусило по-іншому поглянути на епідемічну небезпеку вібріонів не О1 серогрупи і вказало на можливість появи і інших «епідемічних» серогрупп холерних вібріонів. Однак молекулярногенетіческіх механізми, які можуть привести до їх утворення, і ті генетичні події, які послужили причиною появи збудника О139 серогрупи, залишаються практично не вивченими.

    Мета цього огляду полягає в тому, щоб обговорити можливі генетичні механізми, які можуть лежати в основі утворення нових патогенних штамів V. ско! Егае з високим епідемічним потенціалом. Значна увага буде приділена даними, отриманим вітчизняними дослідниками.

    Вивчення штамів V. ско! Егае 0139, виділених в 1992-1993 рр., Показало, що вони близькі патогенним штамів О1 серогрупи биовара ельтор -етіологіческім агентам поточної сьомий пандемії холери, і що перший О139 штам міг статися від токсигенного попередника О1 серогрупи біо- вару ельтор в результаті заміни в його хромосомі генів біосинтезу О-антигену [14]. Аналіз кластера генів ^ ред /, відповідальних за біосинтез 0139 антигену у V. ско! Ете 0139, показав, що в ньому відсутня фрагмент ДНК розміром 22 т.п.н., характерний для генів О1 антигену - кластера м>'Е, але міститься новий унікальний фрагмент, що має розмір 35 т.п.н. [13, 25]. Генетичне оточення генів біо-

    синтезу О-антигену у V. ско! егае 0139 і у V. ско! ете 01 однаково, з правого боку (37 кінець) до них примикає ген rjg, а з лівої (57 кінець) - гени gmhD й обмежен / 2 [24 , 25]. Ділянки ДНК, що лежать між цими фланкуючими генами, відрізняються в обох сіро-груп, за винятком того, що вони обидва містять инсерционно послідовність 751 358.

    Холерні вібріони інших серогруп мають таку ж організацію хромосомної області, що кодує біосинтез О-антигену, що і вібріони О1 і 0139 серогрупи. У них гени О-антигену зібрані в кластер w'*, який також фланкирован генами rjg і gmhD, ог / 2 [24]. Оскільки кластер w'* у холерних вібріонів різних серогрупи має універсальну структуру, найбільш імовірним генетичним механізмом, який призводить до заміни генів біосинтезу О-антигену однієї серогрупи на іншу, є рекомбінація по гомологічним сайтам - генам rjg і gmhD, ог / 2.

    Проведене нами вивчення організації w'* кластера у штамів V. з ^ 1ете НЕ 01, виділених в різних регіонах Російської Федерації та інших країн СНД, зокрема, у штамів 02, 022, 041, 042, 056 і 0139 серогруп, отриманих в 1968 2004 рр. в Астраханській, Ростовській, Московській областях, в Узбекистані і Туркменії, показало, що в хромосомі цих штамів також містяться гени rjg, gmhD й обмежен / 2. Отже, гени, що кодують біосинтез антигенів у цих вібріонів, можуть також змінюватися за рахунок гомологічної рекомбінації [5].

    Таким чином, конкретним генетичним механізмом, який може призводити до заміни генів однієї серогрупи на іншу, є, швидше за все, рекомбінація по гомологічним сайтам. Однак до сих пір залишається невстановленою інший механізм - механізм горизонтального перенесення генетичної інформації, за допомогою якого фрагмент чужорідної ДНК з генами біосинтезу нового антигену, переноситься між штамами V. з ^ 1ете. Передбачається, що цей перенос може бути здійснений бактериофагом, що володіє трансдуці-рующими властивостями, або кон'югатівних плазмидой [19]. До теперішнього моменту описано кілька помірних холерних бактеріофагів (СР-Т1, 132), які можуть переносити фрагменти хромосомної ДНК між штамами V. з ^ 1ете, а також між

    ними і штамами близькоспоріднених видів вібріонів [2, 20]. На особливу увагу заслуговує помірний холерний бактеріофаг, що позначається як 139, K139 або 139ф [21, 23]. Цей бактеріофаг виявлено у штамів V. cholerae 0139, виділених в 1992-1993 рр., А згодом було встановлено, що він набув значного поширення і в інших вірулентних штамах О139 серогрупи, а також часто зустрічається у вібріонів О1 серогрупи биовара ельтор [8, 21] . Вивчено генетичні та імунологічні характеристики фага 139, а недавно його геном був секвенирован [18]. Н.І. Смирнової з со-авт. [7] показано, що геном профага 139 локалізується в хромосомі V. cholerae O139 в безпосередній -ної близькості від генів біосинтезу О-антигену і полисахаридной капсули - їм властивостей для V. cholerae O139. Бактеріофаг 139 здатний здійснювати перенесення прилеглих до нього хромосомних генів за механізмом специфічної трансдукції [9] Ці властивості бактеріофага 139 дозволяють висловити припущення про те, що він дійсно може брати участь в процесі утворення нових патогенних штамів зі зміненими властивостями.

    Нещодавно було встановлено, що в основі появи нових патогенних штамів може лежати і інший генетичний механізм передачі генів -кон'югація [7]. За допомогою сконструйованих Hfr донорів було здійснено перенесення хромосомних генів між різними штамами V. cholerae O139. В експериментальних умовах гени біосинтезу 0139 антигену і капсули були передані в изо-генні 0139 штами, дефектні за цими ознаками. Передані гени ефективно експресуватися в клітинах реципієнтного штаму. Таким чином, була показана принципова можливість передачі генів, що кодують біосинтез О-антигену, між штамами холерних вібріонів методом кон'югації. Можливо, що аналогічний механізм Кон'югаційна перенесення лежить в основі утворення штамів зі зміненими генами біосинтезу О-антигену і в природі.

    До сих пір залишається невстановленою мікроорганізм, що послужив донором специфічного для О139 антигену фрагмента ДНК. Порівняльний біохімічний аналіз О-антигенів різних се-рогрупп показав, що найбільшу близькість до О139 антигену має соматичний антиген холерних вібріонів О22 серогрупи [15]. Ліпополісахарі-ди обох серогрупп мають близький склад цукрів і кодуються генами, які також мають велику схожість. У блот-гібридизації за Саузерну фрагменти генів О139 антигену, використані в якості зонда при аналізі хромосомної ДНК штамів 193 серогрупп, специфічно гібридизується-валися зі штамами О22 серогрупи, що свідчить про наявність протяжних гомологічних ділянок ДНК в хромосомної області біосинтезу О-антигену у штамів 0139 і О22 серогрупи [26]. Однак між ними є і деякі відмінності. Методом ампліфікації протяжного фрагмента ДНК в ПЛР показано, що у вібріонів О22 сіро-групи спостерігається часткове заміщення генів О-антигену в порівнянні з вібріонами 0139 сіро-

    групи, що свідчить про відсутність повної гомології між wb * кластерами цих двох серогрупп [26]. Таким чином, необхідні подальші дослідження для з'ясування того, чи дійсно штам 022 серогрупи був донором специфічних для V. cholerae 0139. Прямим доказом могло б стати, наприклад, отримання в експериментальних умовах штаму, екпрессірующего 0139 антиген, з вібріона 01 серогрупи в результаті перенесення хромосомних генів біосинтезу 022 антигену за допомогою сконструйованого на основі вібріона 022 серогрупи Hfr донорного штаму.

    Молекулярний аналіз штамів, виділених за весь час існування V. cholerae O139, вказав на генетичну неоднорідність вібріонів цієї серогрупи. Поряд з токсигенними штамами 0139 серогрупи, отриманими від хворих людей, виявлені і нетоксігенние штами цієї серогрупи. Спочатку такі штами були отримані за кордоном, в Аргентині та інших країнах [25], а згодом вони виявлені і в пробах з водойм, розташованих на території Російської Федерації - в Іркутській, Московської, Ростовської областей і в Калмикії [1, 6]. Виникло припущення про те, що токсигенні V. cholerae 0139 могли статися від атоксігенних 0139 вібріонів в результаті передачі їм факторів вірулентності від високопатогенних штамів 01 серогрупи. Однак порівняльний аналіз генетичних властивостей нетоксигенних V. cholerae 0139, виділених за кордоном і в різних регіонах РФ [4, 25], виявив існування принципових відмінностей в організації генома токсигенних і нетоксигенних вібріонів 0139 серогрупи. У токсигенних V. cholerae O139 до складу основної або корінної частини хромосоми, що містить гени життєдіяльності клітин, включені острова патогенності (VPI, VPI-2) і помірний -ві холерні фаги CTXj і RS1j, які несуть гени основних факторів вірулентності - холерного токсину, токсинів Zot і Ace, токсінкорегулі-руемих пілей адгезії, а також гени, що регулюють експресію факторів вірулентності. У геномі НЕ-токсигенних 0139 вібріонів відсутні гени холерного токсину ctxAB, гени zot і ace, локалізовані в геномі CTXj [4]. У них також відсутній послідовність нитчастих фага RS1, який є сателітом фага CTXj, і сайт інтеграції фага CTXj - attRS. Як правило, геном «водних» вібріонів не містить гена tcpA, що кодує структурну субодиницю токсінкорегуліруемих пілей - основного фактора колонізації збудника холери, і регуляторного гена toxT, які входять в острів патогенності VPI. Ці дані свідчать про те, що «водні» вібріони 0139 серогрупи, позбавлені основних факторів патогенності, не є безпосередніми попередниками патогенних штамів V. cholerae 0139, які викликали епідемії холери в Південно-Східній Азії в1992-1993 рр.

    Ген gmhD, який фланкирующей у всіх вивчених досі серогрупп V. cholerae гени біосинтезу О-антигену зліва, виявлений і у «водних» вібріонів 0139 серогрупи, однак продукт ампліфікації цього гена в ПЛР у нетоксигенних

    0139 штамів має менший розмір порівняно з токсигенними штамами. Він точно відповідає фрагментам, одержуваних у вібріон не є 01 / НЕ 0139 серогрупи, виділених із зовнішнього середовища. На думку S.M.Faruque et al. [17] це означає, що нетоксігенние штами 0139 серогрупи, швидше за все, ведуть своє походження від вібріонів НЕ 01 серогрупи, що мешкають у зовнішньому середовищі, і що ген gmhD, ймовірно, отриманий ними від штаму-попередника НЕ ​​01 серогрупи.

    Проведене нами вивчення ділянок хромосоми, що фланкують кластер wbf у «водних» 0139 вібріонів, виділених в Росії, показало, що вони так само як і інші холерні вібріони, містять ген gmhD, при ампліфікації якого в ПЛР спостерігається утворення специфічних фрагментів ДНК. Однак отримані фрагменти за розміром відрізняються як від фрагментів токсіген-них 0139 штамів, так і від продуктів ампліфікації нетоксигенних штамів НЕ 01 серогрупи [11]. Мабуть, є деякі відмінності в нуклеотидної послідовності гена gmhD у «водних» вібріонів 0139 серогрупи, що циркулюють на території Російської Федерації, і зарубіжних штамів, на підставі чого можна припустити, що штам-попередник неток-Сигені російських 0139 штамів відрізняється від штаммов- попередників нетоксигенних вібріонів 0139 серогрупи, описаних зарубіжними дослідниками [17].

    Таким чином, авірулентние штами 0139 серогрупи, виділені в Росії, мають суттєві відмінності від вірулентних V. cholerae 0139 в організації генома, оскільки вони не містять островів патогенності і профагов, що кодують біосинтез основних факторів вірулентності. 0ни також значно відрізняються від вірулентних штамів за даними молекулярного типування [3]. Мабуть, водні та вірулентні 0139 вібріони є різні філогенетичні лінії еволюції холерних вібріонів.

    Е.Ю.Щелкановой з співавт. [10] була показана принципова можливість перенесення хромосомних генів за допомогою сконструйованих Hfr донорів від вірулентних штамів V. cholerae O139 в клітини авірулентних 0139 вібріонів, проте передати гени, пов'язані з вірулентністю, не вдалося. Таким чином, хоча і існує можливість придбання «водними» штамами 0139 серогрупи окремих факторів вірулентності за рахунок механізму кон'югації, все ж факт одночасного придбання цими штамами цілого ряду генів, асоційованих з вірулентністю V. cholerae, представляється малоймовірним. Отримані дані свідчать про те, що авірулентние вібріони 0139 серогрупи, що виділяються з водойм на території Російської Федерації, в даний час не становлять епідемічної небезпеки, і, в разі їх виділення, не потрібно проведення комплексу захисних заходів, що застосовуються при виявленні вірулентних штамів V. cholerae.

    Висновки, зроблені щодо російських штамів 0139 серогрупи, не слід екстраполювати на штами, які циркулюють на ендемічних

    по холері територіях. У зв'язку з великою концентрацією вірулентних штамів в водоймах в періоди епідемій і з сприятливими кліматичними умовами в цих регіонах інтенсивність генетичного обміну між вірулентними і авірулент-ними штамами може багаторазово зростати. Так, S.M.Faruque et al. [16] показав, що під дією сонячного світла спостерігається індукція профага CTX, яка призводить до підвищення його титру в 10000 разів. В експерименті ця група авторів спостерігала освіту токсигенного штаму, вирулентного для лабораторних тварин, в результаті фаговой конверсії нетоксігенним О139 вібріона, який, однак, містив острів патогенності VPI і утворював токсінкорегуліруе-мі пили адгезії. Таким чином, існує ймовірність того, що авірулентние вібріони не О1 серогрупи в умовах інтенсивного генетичного обміну, який відбувається між штамами холерних вібріонів у водоймах на ендемічних територіях, можуть поступово нарощувати свій отруйний потенціал за рахунок придбання окремих генів або груп генів, асоційованих з вірулентністю.

    Підводячи підсумки вищесказаного, слід зробити висновок, що найбільш імовірним генетичним механізмом, який міг привести до утворення збудника холери 0139 серогрупи, а також в подальшому може призвести до утворення збудників холери інших серогруп, є горизонтальний перенос генетичної інформації (генів біосинтезу О-антигену) за допомогою механізму трансдукції (наприклад, бактеріофаг 139) або кон'югації (Hfr донори або SXT коньюгатівний елемент) з їх подальшою інтеграцією за рахунок рекомбінації по гомологічним сайтам в хромосому в исоковірулентного штаму V. cholerae 01. Можливий і інший шлях утворення патогенних штамів НЕ 01 серогрупи - з слабопатогеннимі холерних вібріонів, що мешкають у зовнішньому середовищі, за рахунок придбання факторів вірулентності, розташованих у збудника холери на островах патогенності і помірних холерних бактеріофагів. Цей шлях є більш довгим у порівнянні з вищевказаним механізмом, однак, його все ж слід враховувати, приймаючи до уваги сприятливі кліматичні і соціальні умови в ендемічних по холері регіонах. В даний час на цих територіях склалася стійка рівновага штамів 01 і 0139 серогрупи, боротьба між -ду якими сприяє, в кінцевому підсумку, подальшої еволюції збудника холери в бік збільшення його патогенних і, можливо, «пандемічний» властивостей.

    Робота підтримана грантом РФФД № 05-0448727.

    СПИСОК ЛІТЕРАТУРИ

    1. Ганін В.С., Урбанович Л.Я., Марамовіч А.С. з співавт. // Матер. науч. конф., посв. 100-річчю утворення протичумної служби Росії. - Саратов, 1997. - Т. 1. -С. 30. - 2. Єрошенко Г.А., Смирнова Н.І. // Пробл. особливо небезпечних інф. - 1993. - Вип. 3 (73). - С. 202-205. - 3. Єрошенко Г.А., Осін А.В., Смирнова Н.І. // Пробл. особливо небезпечних інф. - Саратов, 2002. - С. 80-85. - 4. Єрошенко

    Г. А., Осін А.В., Щелканова Є.Ю., Смирнова Н.І. // Мол. генет., микробиол. і вірусологія. - 2004. - № 2. - С. 11-16. -5. Єрошенко Г.А., Щелканова Є.Ю. // Пробл. особливо небезпечних. інф. - 2005. - Вип. 2 (90). - С. 43-46. - 6. Онищенко Г.Г., Ломов Ю.М., Покровський В.І. та ін. Актуальні проблеми холери / Под ред. Покровського В.І. - М., 2000. -384 с. - 7. Смирнова Н.І., Єрошенко Г.А., Чеховська Г. В. з співавт. // Мол. генет., микробиол. і вірусологія. - 1996. -№ 2. - C. 14-18. - 8. Смирнова Н.І., Єрошенко Г.А., Щелканова Є.Ю. та ін. // Мол. генет., микробиол. і вірусологія. - 1999. - № 1. - С. 17-22. - 9. Щелканова Є.Ю., Єрошенко Г.А., Осін А.В. та ін. // Холера і патогенні для людини вібріони. - Ростов н / Д, 2000. - Вип. 13. - С. 61-63. -10. Щелканова Є.Ю., Осін А.В., Єрошенко Г.А., Смирнова Н. І. // Холера і патогенні для людини вібріони. - Ростов н / Д, 2002. - Вип. 15. - С. 75-76. - 11. Щелканова Є.Ю., Єрошенко Г.А. // Холера і патогенні для людини вібріони. - Ростов н / Д, 2005. - Вип. 18. - С. 75-76. -12. Alam M., Hasan N.A., Sadique A. et al. // Appl. Environ. Microbiol. - 2006. - Vol. 72 (6). - P. 4096-104. - 13. Bik E.M., Bunschoten A.E., Gouwn R.D. // EMBO. - 1995. -Vol. 14, N 2. - P. 209-216. - 14. Calia K.E., Murtagh M., Ferraro M.J., Calderwood S.B. // Infect. Immun. - 1994. -Vol. 62. - P. 1504-1506. - 15. Dumontier S., Berche P. // FEMS Microbiol. Lett. - 1998. - Vol. 164. - P. 91-98. -16. Faruque S.M., Asadulghani, Rahman M.M. et al. // Infect. Immun. - 2000. - Vol. 68. - P. 4795-4801. - 17. Faruque S.M., Sack D.A., Sack R.B. et al. // PNAS. - 2003. -Vol. 100, N 3. - P. 1304-1309. - 18. Kaphammer D., Dlass J., Evens S., Reidl J. // J. Bacteriol. - 2002. - Vol. 184. -P. 6592-6601. - 19. Mooi F.R., Bik E.M. // Trends Micro-

    biol. - 1997. - Vol. 5, N 4. - P. 161-165. - 20. O 'Shea Y.A., Boyd E.F. // FEMS Microbiol. Lett. - 2002. - Vol. 214. - P. 153157. - 21. Reidl J., Mekalanos J.J. // Mol. Microbiol. -1995. - Vol. 18. - P. 685-701. - 22. Sinha S., Chakraborty R., De K. et al. // J. Clin. Microbiol. - 2002. - Vol. 40, N 7. -P. 2635-2637. - 23. Smirnova N.I., Chekovskaya G.V., Davidova N.T. et al. // FEMS Mirobiol. Lett. - 1996. -Vol. 136. - P. 175-180. - 24. Sozhamannan S., Deng Y.K., Li M. et al. // Infect. Immun. - 1999. - Vol. 67. - P. 5033-5040. -25. Stroeher U.H., Parasivam G., Dredge B.K. et al. // J. Bacteriol. - 1997. - Vol. 179. - P. 2740-2747. - 26. Yamasaki S., Shimizu T., Hoshino K. et al. // Gene. - 1999. -Vol. 237. - P. 321-332.

    G.A.Y eroshenko

    Vibrio cholerae O139: Genetics and Molecular Mechanisms of Origination of the Non-O1 Serogroup Cholera Pathogen

    Russian Anti-Plague Research Institute "Microbe", Saratov

    Discussed in the review are the most likely genetic mechanisms, that might underlie the formation of new pathogenic V. cholerae strains manifesting high epidemic potential.

    Key words: cholera pathogen, molecular mechanisms of formation of new pathogenic strains.

    nocTynHHa 21.07.06.

    УДК 616.91 / 98: 615/371

    В.В.Кутирев1, З.Л.Девдаріані1, Л.В.Саяпіна2

    СУЧАСНИЙ СТАН НАУКОВИХ ДОСЛІДЖЕНЬ В ОБЛАСТІ ВАКЦИНОПРОФІЛАКТИКИ ОСОБЛИВО НЕБЕЗПЕЧНИХ БАКТЕРІАЛЬНИХ ІНФЕКЦІЙ

    Російський науково-дослідний протичумний інститут «Мікроб», Саратов;

    2Государственний інститут стандартизації і контролю ім. Л.А. Тарасевича, Москва

    Представлений огляд літератури за станом наукових досліджень в області вакцинопрофілактики особливо небезпечних бактеріальних інфекцій за останні 5-10 років. Дана характеристика декількох поколінь вакцинних препаратів, визначені тенденції розвитку науки в цій галузі медицини. Приділено увагу дослідженням з розробки препаратів для екстреної вакцинопрофілактики особливо небезпечних інфекцій в разі епідемічних ускладнень, пов'язаних з біотероризмом, природними катаклізмами, аваріями техногенного характеру.

    Ключові слова: вакцина, вакцинопрофілактика, особливо небезпечні бактеріальні інфекції.

    Імунопрофілактика особливо небезпечних бактеріальних інфекцій (чума, бруцельоз, сибірка, туляремія, холера), збудники яких відносяться до мікроорганізмів 1-11 груп патогенності [2], проводиться в рамках Російського національного календаря щеплень за епідемічними показаннями [22]. Що стосується сапу і меліоїдоза, то ці екзотичні хвороби не зареєстровані в Російській Федерації. Однак територіальна близькість ендемічних вогнищ зазначених інфекцій в суміжних країнах (Туреччина, Іран, Ірак, Афганістан, Китай, Монголія), активні міжнародні та економічні зв'язки створюють реальну загрозу можливого занесення їх до Росії з усіма витікаючими з цього наслідками [32].

    Особливої ​​актуальності набувають досліджень-

    ня в області вдосконалення вакцінопрофі-лактики особливо небезпечних бактеріальних інфекцій, збудники яких входять в I-II групу можливих біологічних агентів [3], у зв'язку із збільшеною вірогідністю здійснення біотерористичних актів групами диверсантів або окремими країнами після відомих «поштових» терактів в США в 2001 м, коли після розтину надійшли листів зі спорами Bacillus anthracis постраждало більше 20 чол., з них 5 - загинули від легеневої форми сібіреязвенной інфекції [42].

    Для специфічної профілактики особливо небезпечних бактеріальних інфекцій застосовується ряд вітчизняних і зарубіжних ліцензованих вакцин (таблиця). Необхідно відзначити, що країни, які розробляють і виробляють вакцини проти ін-


    Ключові слова: Збудник холери / МОЛЕКУЛЯРНІ МЕХАНІЗМИ ОСВІТИ НОВИХ патогенні штами / CHOLERA PATHOGEN / MOLECULAR MECHANISMS OF FORMATION OF NEW PATHOGENIC STRAINS

    Завантажити оригінал статті:

    Завантажити