Область наук:
  • ветеринарні науки
  • Рік видавництва: 2010
    Журнал: JSAP / Російське видання

    Наукова стаття на тему 'Контроль ефективності терапії гіперадренокортицизм собак трілостаном по концентрації білків гострої фази'

    Текст наукової роботи на тему «Контроль ефективності терапії гіперадренокортицизм собак трілостаном по концентрації білків гострої фази»

    ?ОРИГІНАЛЬНА СТАТТЯ

    Контроль ефективності терапії гіперадренокортицизм собак трілостаном по концентрації білків гострої фази

    Обгрунтування: білки гострої фази (БОФ) включають гаптоглобин (Нр), С-реактивний білок (СРБ) і сироватковий амілоїд А (САА). Підвищення концентрації Нр у собак може індукувати ендогенними або екзогенними глюкокортикоїдами.

    Цілі: з'ясувати, чи впливає успішний контроль гіперадренокортицизм на концентрації Нр, СРБ, САА, холестерину і активність лужної фос-фатази (ЛФ), і встановити можливість використання цих показників для оцінки ефективності терапії гіперадренокортицизм трілоста-ном, а також встановити достовірність поєднання даних тестів як методу оцінки ефективності терапії.

    Методи: Нр, ​​СРБ, СО, ЛФ і холестерин визначали в плазмі 11 собак зі спонтанним гіперадренокортицизм (ДАК) до і після лікування трілостаном. Лікування вважали ефективним при концентрації кортизолу після проби з АКТГ менше 150 нмоль / л.

    Результати: у тварин, що відповідали на терапію, виявлено значне зниження Нр, ЛФ, холестерину і САА (Р < 0,05), але не СРБ. Інформативним виявилося лише визначення Нр, холестерину і ЛФ, однак інформативність методу для оцінки ефективності контролю захворювання була помірною (чутливість і специфічність більше 0,7) в порівнянні зі стимуляцією адренокортикотропіну або кортікотропі-ном (АКТГ). Визначення САА і СРБ не мало діагностичного значення (чутливість і специфічність менше 0,7). Аналіз поєднання даних показників не підвищував кореляцію з результатами проби з АКТГ.

    Клінічне значення: визначення даних показників при оцінці ефективності лікування ДАК трілостаном не дає будь-якої нової інформації, яка могла б доповнити результати проби з АКТГ.

    A. Arteaga, N.K. Dhand, T. McCann, C.M. Knottenbelt, A.J. Tebb, H. Evansa, P. David Eckersall and I.K. Ramsey

    Journal of Small Animal Practice (2010) 51, 204-209 DOI: 10.1111 / j.1748-5827.2009.00863.x

    ВСТУП

    Утворені при пошкодженні клітин цитокіни індукують зміна концентрації деяких глікопротеїнів (білки гострої фази -БОФ), що синтезуються переважно в печінці. БОФ включають

    гаптоглобин (Нр), С-реактивний білок (СРБ), сироватковий амілоїд А (САА), церулоплазмін, ^ кислим глікопротеїном і фібриноген (Ceron і ін. 2005). Динаміка концентрації БОФ варіює залежно від виду тварин і природи ушкодження (Eckersall and others 1999). БОФ

    вважаються інформативним показником для діагностики, прогнозу і контролю ефективності лікування в медицині (Child and others 1978, Kushner and Mackiewicz 1987, Thomson and others 1992). Поява в продажу готових ветеринарних діагностичних наборів розширило можливості використання цього методу для тварин.

    Гіперадренокортицизм (ДАК) -распространённое ендокринне порушення у собак (Feldman and Nelson 2004). В даний час єдиним ліцензованим препаратом для лікування ДАК у собак є трілостан (Веторіл, Декра ветеринарії Продактс Лтд., Шрусбері, Великобританія). Він являє собою оборотний конкурентний інгібітор 3р-гідроксістероід-дегідрогенази, блокуючий біосинтез стероїдів в надниркових залозах, пригнічуючи вироблення кортизолу. В даний час для контролю ефективності лікування ДАК рекомендується проба зі стимуляцією адрено-кортикотропіном або кортикотропіном (АКТГ) (Neiger and others 2002 Ruckstuhl and others 2002 Herrtage 2004).

    Концентрація Нр в сироватці собак підвищується під дією ендогенних та екзогенних глюкокор-тікоідов (Harvey and West 1987, MartTnez-Subiela and others 2004). Цей ефект приписують прямий індукції стероїдами (McGrotty and others 2003).

    Екзогенні глюкокортикоїди не впливають на концентрації інших БОФ, наприклад СРБ і САА (Thomson and others 1992). У літературі немає даних про зміну СРБ і САА у собак з ДАК. Раніше ми показали підвищення Нр у собак при ДАК, при цьому у собак, які отримували

    терапію ДАК, концентрація Нр була нижче (хоча і вище норми) (McGrotty and others 2005).

    До біохімічними показниками, підвищення яких при неконтрольованому ДАК у собак найбільш постійно, відносять лужну фосфатазу (ЛФ) і холестерин (76 і 90% випадків відповідно) (Ling and others 1979). Показано значне зниження обох показників після лікування (Ruckstuhl and others 2002 Perez-Alenza and others

    2006). Співвідношення кортизолу і креатиніну в сечі, а також мала дексаметазоновая проба неінформативні в якості показників ефективності терапії (Angles and others тисячі дев'ятсот дев'яносто сім, Ruckstuhl and others

    2002 Braddock and others 2003).

    Дорожнеча АКТГ в деяких країнах створює необхідність в альтернативних методах (Behrend and others 2006). Навіть в країнах, де АКТГ щодо дешевий, проба з АКТГ не дозволяє оцінити довготривалий контроль концентрації кортизолу. Останній необхідний для успішного лікування ДАК, т. Е. Маркер повинен відображати контроль кортизолу протягом тривалого часу (за аналогією з фруктоза-мином при діабеті). Дане дослідження проведено, щоб оцінити, чи супроводжується ефективний контроль ДАК при терапії Тріль-станом (який визначається за концентрацією кортизолу в сироватці після проби з АКТГ) значною зміною сироватковоїконцентрації БОФ (Нр, СРБ і САА), а також холестерину. Вторинної метою було встановлення можливості використання БОФ, ЛФ і холестерину в якості альтернативних показників для оцінки ефективності лікування ДАК трілостаном, а також оцінити вірогідність цього методу при оцінці ефективності терапії.

    Для дослідження було відібрано 16 належать власникам собак, спрямованих в клініку дрібних домашніх тварин Університету Глазго. Клінічні ознаки,

    результати огляду, біохімічного та клінічного аналізу крові всіх собак відповідали діагнозу ДАК (Herrtage 2004). Діагноз був підтверджений внутрішньовенної пробою з АКТГ (Синактен, Альянс Фарма-цевтікалз Лтд., Вільтшір, Великобританія) і / або відсутністю зниження концентрації кортизолу при малій дексаметазоновой пробі і очевидному одно- або двосторонньому збільшенні наднирників за результатами УЗД черевної порожнини. Пробу з АКТГ і малу дексамета-зонову пробу проводили, як описано раніше (Herrtage 2004).

    Трьом собакам був поставлений діагноз ДАК надниркової етіології, і їх виключили з дослідження. Етичне схвалення всіх процедур в рамках дослідження було отримано у місцевої комісії з етики під управлінням британського головного офісу. Всі показники визначали в зразках крові, взятих до введення АКТГ (за винятком кортизолу після проби з АКТГ) при надходженні в клініку, а потім через 2, 4, 12 і 24 тижні після початку терапії трілоста-ном (початкова доза 30-60 мг всередину кожні 12-24 год). В даному дослідженні критерієм ефективності терапії ДАК вважали концентрацію кортизолу після введення АКТГ менше 150 нмоль / л (Herrtage 2004, McGrotty and others 2005) при аналізі через 4-6 годин після введення три-лостана. Результати визначення цих показників реєстрували і порівнювали зі значеннями до лікування. Якщо ГАК не вдавалося контролювати, собак виключали з дослідження. Зі статистичного аналізу також виключали собак з ДАК надниркової етіології. Під час дослідження жодна з собак не отримувала будь-яких інших ліків. Сироватку для визначення БОФ отримували з яремної вени і заморожували при -20 ° С для подальшого одночасного аналізу. Нр вимірювали за раніше описаним методом (McGrotty and others

    2003). СРБ і САА вимірювали за допомогою мікропланшетном фотометра (Трідельта Девелопмент Лтд., Ірландія), розробленого для визна-

    ділення концентрації САА у різних видів тварин і пройшов перевірку для аналізу зразків сироватки собак в нашій лабораторії. Точність аналізу оцінювали раніше за коефіцієнтами варіації (КВ) всередині однієї серії аналізів і між різними серіями. КВ в межах однієї серії вираховували за КВ результатів аналізу проби в двох повторностях (Fraser 1986); вони склали 1,82 і 2,85% в діапазоні концентрацій Нр від 18 до 74 мкг / мл і 3 і 1,2% в діапазоні концентрацій САА від 46,7 до 178 мкг / мл. Варіабельність результатів між серіями проб також обчислювали за результатами дворазового повторного аналізу контрольних зразків. КВ були 5,63 і 4,83% при середній концентрації Нр 0,28-0,73 г / л. КВ між серіями проб вираховували також для СРБ і САА за результатами повторного аналізу контрольних проб в кожній серії. КВ були 11,1 і 12,6% при середній концентрації СРБ 19-75 мкг / мл (Mishcke and others 2007) і 26 і 15% при середніх концентраціях САА 56 і 189 мкг / мл (ReactivLab, University of Glasgow, Bearsden, Scotland, data on file). Правильність методу підтверджували шляхом аналізу серійних розведень стандартів і досвідчених проб сироватки від собак з підвищеною концентрацією СРБ і САА. За опублікованими даними, нормальний вміст Нр для собак складає 2,2 г / л, а концентрація вище 10 г / л вважається ознакою сильної запальної реакції (Eckersall and others 1999a). Нормальні межі СРБ складають 0,46-9,6 мкг / мл (Mischke and others

    2007), а САА - 0,08-8,75 мкг / мл (ReactivLab, data on file).

    Активність ЛФ в плазмі вимірювали стандартним методом в комерційній лабораторії (Національні Лабораторії, Ланкашир, Великобританія). Норми ЛФ у собак (0-100 МО / л) і холестерину (3,9-7,8 ммоль / л), що використовувалися в даному дослідженні, отримані з лабораторії. Концентрацію кортизолу до і після стимуляції АКТГ вимірювали за допомогою готових твердофазної радіоімму-

    МАТЕРІАЛИ ТА МЕТОДИ

    нологічних тест-систем (Coat-a-Count, DPC), які пройшли атестацію для аналізу проб від собак (Спеціалізована лабораторна служба Кембриджа, Кембридж, Великобританія).

    Статистичний аналіз проводили за допомогою статистичної програми SAS (версія 9.1, © 2002-2003, SAS Institute Inc., Cary, NC, USA). Для оцінки зміни концентрації аналізованих компонентів використовували знаково-ранговий критерій Уилкоксона (час = 0) в порівнянні з контролем захворювання (час = 1). Цей непараметрический критерій був краще відповідного параметричного парного t-критерію, оскільки розподіл відмінностей (значна різниця Р < 0,05) концентрації метаболіту навряд чи було нормальним, що є важливим припущенням параметричного критерію. Криві співвідношень правильного і помилкового сигналів для Нр, САА, СРБ, ЛФ і холестерину будували за допомогою онлайн-макросу SAS,% ROCPLOT (http://support.sas.com/kb/25/018.html) і використовували для оцінки чутливості і специфічності методу контролю хвороби при різних концентраціях аналізованих компонентів, відповідних граничному значенню.

    Інший онлайн-макрос,% ROC (http://support.sas.com/kb/25/017.html), використовувався для обчислення площ під кривими і довірчих інтервалів. Потім використовували різні поєднання аналізованих параметрів, що досліджувалися послідовно або паралельно, після визначення їх ковариантности (Dohoo and others 2003). Визначається-

    Чи чутливість і специфічність при оптимальних граничних значеннях (максимальна чутливість і специфічність) для різних аналізованих метаболітів, які використовували для порівняльної оцінки дискримінує здатності парних визначень при послідовному або паралельному аналізі.

    РЕЗУЛЬТАТИ

    Дві з 13 включених в дослідження собак різних порід зі спонтанним гіпофізарний ДАК були виключені зі статистичного аналізу. У одній з них концентрація кортизолу після проби з АКТГ була вище 150 нмоль / л, а для іншої було недостатньо лабораторних даних. Дані за знайденими

    11 собакам включили в остаточний аналіз. Вік собак був від 6 до 12 років (середній 8,6, медіана 8,5). Серед них було 7 псів і 4 суки, маса тіла варіювала від 4,2 до 46 кг (середня 17,75, медіана 9). Всі собаки, за винятком однієї, отримували трілостан двічі на добу. Через 2 тижні лікування у 2 собак з 6 концентрація кортизолу після введення АКТГ знизилася до бажаної (менше 150 нмоль / л), через

    12 тижнів - ще у 2 собак і через 24 тижні - у 3. Відзначено статистично значуще зниження Нр, САА, ЛФ і холестерину до і після лікування трілостаном. Однак статистично значущої різниці в концентрації СРБ до і після лікування не виявлено. До лікування у 100% собак концентрація Нр була вищою за норму, а у 9,09% (1/11) і 18,1% (2/11) собак виявлені підвищений-

    ні сироваткові концентрації СРБ і САА відповідно. У всіх собак, як до, так і після лікування трілостаном, виявлена ​​підвищена активність ЛФ. Концентрація холестерину була підвищена у 90,9% собак (10/11) до і 45,45% (5/11) після лікування трілостаномм (табл. 1). Були побудовані криві співвідношень правильного і помилкового сигналів (рис. 1а та 1Ь). Площі під кривою і 95% довірчі інтервали (табл. 2) свідчать про варіації площ під кривою концентрації різних аналізованих метаболітів від 0,58 до 0,82.

    Чутливість і специфічність при оптимальних граничних значеннях, визначених за кривими співвідношення правильного і помилкового сигналів (табл. 2), перевищували 0,7 тільки для Нр, холестерину і ЛФ; при визначенні інших метаболітів або чутливість, або специфічність були менш 0,7. Таким чином, досліджувався тільки поєднання Нр, холестерину і ЛФ при послідовному або паралельному аналізі проб. При паралельному аналізі чутливість була вище (0,95), але специфічність - нижче (0,55). І навпаки, при послідовному аналізі чутливість була нижче (0,59), а специфічність - вище.

    ОБГОВОРЕННЯ

    Дане дослідження показало значне зниження концентрації Нр в сироватці собак після лікування ДАК трілостаном, хоча вона залишалася вищою за норму у всіх собак, крім однієї. Це узгоджується з результатами нашого попе-

    Таблиця 1. Концентрація різних метаболітів при надходженні (час 0) і на перший контрольний момент часу (час 1)

    Одиниці Норми Час 0 Час 1 Значення Р

    середовищ. медіана межквартільное значення діапазон середовищ. медіана межквартільное значення діапазон

    Нр, г / л 0-2,2 8,09 7,45 5,7 2,8-13,6 4,55 4,20 2,30 1,5-8,1 0,0002 *

    СРБ, мкг / мл 0,46-9,6 4,69 1,58 1,15 0-27,5 6,04 2,05 3,76 0,32-41,5 0,9

    САА, мкг / мл 0,08-8,75 2,04 1,10 1,95 0-9,5 1,55 0,30 1,08 0-14,9 0,03 *

    ЛФ, МО / л 0-100 1010,15 830,00 470 113-4091 456,92 269,00 406,50 118-2068 0,002 *

    Холестерин, моль / л 3,9-7,8 10,18 9,60 3,3 6,7-16,8 7,35 6,70 2,77 4,8-11,5 0,001 *

    Значення, відмічені *, вказують на статистично значуща відмінність (Р < 0,05)

    ного дослідження (McGrotty and others 2005). Наскільки відомо авторам, це перша публікація, яка описувала зміни СРБ і САА у собак зі спонтанним ДАК до і після лікування.

    Хоча ми виявили значне зниження концентрації САА при ефективному контролі ДАК, цей результат слід інтерпретувати з обережністю, оскільки у більшості собак в даному дослідженні концентрація САА залишалася в межах норми як до, так і після лікування. Як і у випадку з Нр, підвищення концентрації СРБ у одній з собак під час дослідження після успішного контролю ДАК може бути пов'язано з супутнім або основним запальним захворюванням, що не виявленими при клінічному дослідженні (Onishi and others 2000, Kobelt

    and others 2003 Ceron and others 2005, Tecles and others 2005, Caldin and others 2009).

    Підвищення концентрації Нр відзначається при ряді хвороб (Harvey and West 1987, McGrotty and others

    2003 Martinez-Subiela and others

    2004).

    У літературі описані супутні запальні стану у собак з ДАК, в т. Ч. Контрольованим, що супроводжуються підвищенням Нр, зокрема піодермії, інфекція сечовивідних шляхів, остеоартрит і новоутворення (Feldman and Nelson 2004, Caldin and others 2009). Ці стани, за винятком новоутворень гіпофізу, не супроводжувалися очевидними клінічними симптомами. Однак не можна виключити захворювання в субклінічній формі. Механізм індукції синтезу Нр у зі-

    бак під дією кортизолу і екзогенних глюкокортикоїдів невідомий (Martinez-Subiela and others

    2004, McGrotty and others 2005). Описано накопичення ендогенних попередників АКТГ і кортизолу після лікування трілостаном (Siebert-Ruckstuhl and others 2006). У собак з атиповим ДАК і підвищеною концентрацією стероїдних гормонів (інших, ніж кортизол) можливі подібні біохімічні зміни крові (Oliver 2007). Таким чином, автори цього дослідження припускають, що накопичення попередника кортизолу у собак, які отримують трілостан, може також сприяти підвищенню інших показників, наприклад ЛФ або Нр.

    Meijer (1980) припустив, що активність ЛФ є одним з найбільш інформативних лабораторні-

    специфічність

    специфічність

    - л - Холестерин см - • - СРБ

    Мал. 1а. (А) Криві співвідношень правильного і помилкового сигналів для гаптоглобина (Нр) і лужної фосфатази (ЛФ) після ефективного контролю гіперадренокортицизм (кортизол після введення АКТГ < 150 нм / л) і (Із) для С-реактивного білка (СРБ), сироваткового амілоїду А (САА) і холестерину після успішного контролю гіперадренокортицизм (кортизол після введення АКТГ < 150 нм / л)

    Таблиця 2. Площа під кривими і відповідні 95% довірчі інтервали для різних метаболітів. СО = середньоквадратична помилка, ППК = площа під кривою

    Показники ППК СО Довірчий інтервал Граничне значення Чутливість Специфічність

    Нр 0,82 0,09 0,62, 1,00 4,80 0,73 0,91

    СРБ 0,51 0,13 0,25, 0,77 2,26 0,46 0,82

    САА 0,69 0,12 0,45, 0,93 0,19 0,64 0,82

    ЛФ 0,74 0,12 0,50, 0,97 531,00 0,80 0,73

    Холестерин 0,82 0,09 0,64, 1,00 6,2 0,60 1,0

    них показників для підтвердження діагнозу при підозрі на ДАК, і в ході попередніх досліджень було виявлено значне зниження активності ЛФ після терапії трілостаном (Ruckstuhl and others 2002 Perez-Alenza and others 2006). Ми виявили підвищену активність ЛФ у всіх собак до лікування і значне зниження після лікування, що узгоджується з цими роботами, проте значення залишалися вище норми. За це можуть бути відповідальні такі фактори, як мала тривалість дії трілостана, індукція ферментів внаслідок накопичення інших попередників кортизолу або супутніх патологічних процесів (Dunn and others

    1995 року, Neiger and Hurley 2001, Siebert-Ruckstuhl and others 2006). У більшості собак з ДАК 70% загальної активності ЛФ доводиться на ізоформу ЛФ, индуцируемую стероїдами (Wilson and Feldman 1992). У цьому дослідженні визначали тільки загальну ЛФ сироватки. Можливо, вимір активності ізоформи, індукований стероїдами, дало б значно більші результати. Хоча визначали ЛФ, индуцируемую стероїдами, в ході декількох досліджень на собаках з ДАК (Teske and others 1989, Wilson and Feldman 1992 року, Solter and others 1993), можливість застосування ЛФ або ізоформи, індукований стероїдами, як показник для оцінки контролю ДАК при терапії трілостаном або мітотаном не вивчалась.

    Показано, що холестерин, як і ЛФ, підвищується при ДАК у собак (Ling and others 1979, Meijer 1980). У літературі вже описано значне зниження холестерину сироватки при успішному лікуванні ДАК трілостаном (Ruckstuhl and others 2002), що узгоджується з нашими результатами. Зниження концентрації холестерину після лікування може бути обумовлено посиленням ефективності шляхів ферментативного перетворення ліпідів. Про вплив підвищення ендогенного АКТГ та інших попередників кортизолу (Siebert-Ruckstuhl and others

    2006) нічого не відомо, але воно могло призводити до підвищення холестерину у деяких собак в дослідженні.

    Другою метою дослідження було встановити можливість використання БОФ, ЛФ і холестерину в якості альтернативних показників для оцінки ефективності терапії ДАК у собак трілостаном. В даний час для оцінки контролю ДАК у собак, які отримують лікування мито-таном (Dunn and others 1995) або трілостаном (Neiger and others 2002 Ruckstuhl and others 2002 Braddock and others 2003), рекомендується проба з АКТГ. Нормальний діапазон концентрацій кортізрола в сироватці після проби з АКТГ у собак, які отримують трілостан, визначений як 30-250 нмоль / л (Neiger and others

    2002 Ruckstuhl and others 2002 Brad-dock and others 2003). Ми використовували довільно обрану концентрацію кортизолу після проби з АКТГ (< 150 нмоль / л), грунтуючись на результатах попереднього дослідження, виконаного нашою групою (McGrotty and others 2005).

    Альтернативний метод можна вважати точним (в порівнянні з «золотим стандартом»), якщо площа під кривою дорівнює 0,9-1 при даному граничному значенні. При площі під кривою від 0,7 до 0,9 інформативність методу вважається помірною (Greiner and others 2000). За допомогою кривих співвідношень правильного і помилкового сигналів ми виявили, що найбільш інформативними показниками для оцінки контролю хвороби при терапії трілостаном є Нр, холестерин і ЛФ, так як площі під кривими для них були вище, ніж для СРБ і САА. При порівнянні Нр, холестерину і ЛФ з концентраціями кортизолу після АКТГ цей метод був помірно інформативним (максимальна чутливість і специфічність близько 73%). СРБ і САА погано підходять в якості показників контролю захворювання. Цей результат не був несподіваним у разі СРБ, з огляду на відсутність значних змін його концентрації після лікування три-лостаном.

    Остаточною метою дослідження було визначення достовірності поєднання показників в якості методу оцінки контролю ДАК. Поєднання СРБ і САА не дослідили через низьку чутливість і специфічність визначення цих показників, що, швидше за все, ще більше знизить чутливість і специфічність аналізу їх комбінації (Dohoo and others 2003). Поєднання Нр, холестерину і ЛФ при паралельному і послідовному визначенні виявилося неінформативним в зв'язку зі зниженням специфічності і чутливості комбінованого тесту.

    Це дослідження має ряд обмежень. Можливо, мала кількість випадків знижує його статистичну потужність, однак не впливає на результати, які опинилися значущими. Іншими словами, істинність виявлених відмінностей високій ймовірності. Для подальшої оцінки результатів, визначених у даному дослідженні як незначущі, потрібна була б велика вибірка. Іншим обмеженням дослідження є застосування статистичного методу оцінки його визначення декількох метаболітів на підставі «золотого стандарту» (проба з АКТГ). Отже, при порівнянні результатів аналізу різних показників з результатами визначення кортизолу після проби з АКТГ ми приймаємо діагностичну значимість останнього методу за 100% (Greiner and others 2000). Однак проба з АКТГ не є абсолютно чутливої ​​або специфічною, і оцінка контролю хвороби у собак, які отримують трілостан, все ще спирається також на клінічні спостереження за перебігом хвороби (Braddock and others 2003 Feldman and Nelson 2004).

    В даний час проходять оцінку деякі інші методи діагностики та оцінки контролю ДАК, наприклад внутрішньом'язова проба з АКТГ, визначення кортизолу в слині і співвідношення кортикоидов / КРЕА-тініна в сечі після малої дексаме-тазоновой проби (Kobelt and others

    2003 Vaessen and others 2004, Behrend and others 2006).

    Як показник контролю ДАК ми використовували довільне граничне значення концентрації кортизолу в сироватці менше 150 ммоль / л (Herrtage 2004, McGrot-ty and others 2005). Це може не відповідати повного контролю клінічних проявів. Інші автори запропонували використовувати менші концентрації кортизолу після введення АКТГ (< 70 нмоль / л) для випадків з добре контрольованим захворюванням (Ruckstuhl and others 2002). Можливо, при використанні більш низького граничного значення зміна деяких проаналізованих показників було б більш значущим. Граничне значення концентрації кортизолу менше 15 нмоль / л було запропоновано як показник надмірної контролю ДАК (Braddock and others 2003). Ці собаки входять в групу ризику гіпокортізолеміі і можуть потребувати зниження дози трілостана. Ні в однієї з собак в даному дослідженні концентрація кортизолу в сироватці не падала нижче за це значення, хоча межа кількісного визначення кортизолу дорівнює 6,89 моль / л. На результати вимірювання БОФ, ЛФ і холестерину може впливати гіпер-ліпідемія, гіпербілірубінемія і / або гемоліз (Kaplan and Pesce

    1996 року, Martinez-Subiela and Ceron

    2005). Однак лабораторія не повідомляла про очевидні зміни в зразках для аналізу. Характер зміни концентрації БОФ у собак з пухлинами надниркових залоз може відрізнятися через супутньої запальної реакції внаслідок зростання самої пухлини (Teske and others 1989), тому такі собаки були виключені зі статистичного аналізу. Число собак з пухлинами надниркових залоз в нашому дослідженні було занадто малим для аналізу цього ефекту. Для оцінки їх впливу на концентрацію БОФ необхідні подальші дослідження з великими когортами собак, які отримують трілостан. Ми оцінили тільки БОФ, ЛФ і холестерин в певний момент часу, що може виявитися недостатнім для пояснення ха-

    рактера зміни концентрації різних метаболітів за більш тривалий період часу. Необхідні подальші дослідження для оцінки інших БОФ у собак з ДАК надниркової і гіпофізарної природи на різних стадіях контролю, наприклад ai-кислий глікопротеїн, церулоплазмін або а1-анти-протеаза. На закінчення можна сказати, що даний дослідження показало значні зміни Нр, САА, ЛФ і холестерину і відсутність значних змін концентрації СРБ після успішного лікування ДАК трілостаном. У порівнянні з пробою з АКТГ, інформативність визначення даних метаболітів у собак з ДАК варіювала від меншої до помірної, навіть в поєднанні. Таким чином, визначення Нр, СРБ, САА, ЛФ і холестерину не можна рекомендувати як методу оцінки ефективності контролю гіперадренокор-тіцізма гіпофізарної або надниркової природи у собак, які отримують трілостан.

    Подяки

    Автори хотіли б подякувати Європейському коледж внутрішніх хвороб тварин, завдяки фонду клінічних досліджень якого цей проект став можливим. Крім того, вони хотіли б подякувати ветеринарних лікарів і молодший персонал, які брали участь в лікуванні тварин.

    література

    Angles J.M., Feldman E.C., Nelson R.W. & Feldman M.S. (1997) Use of urine cortisol: creatinine ratio versus adrenocorticotropic hormone stimulating testing for monitoring mitotane treatment of pituitary-dependent hyperadrenocorticism in dogs. Journal of the American Veterinary Medicine Association 211, 1002-1004 Behrend E.L., Kemppainen R.J., Bruyette D.S., Bush K.A. & Lee H.P (2006) Intramuscular administration of a low dose of ACTH for ACTH stimulation testing in dogs. Journal of the American Veterinary Medicine Association 229, 528-530 Braddock J.A., Church D.B., Robertson I.D. & Watson A.D.J. (2003) Trilostane treatment in dogs with pituitary-dependent hyperadrenocorticism. Australian Veterinary Journal 8, 600-607 Caldin M., Tasca S., Carli E., Bianchini S., Furlanello T, Martinez-Subiela S. & Ceron J.J. (2009) Serum acute

    phase protein concentrations In dogs with hyperadrenocorticism with and without concurrent infl amma-tory conditions. Veterinary Clinical Pathology 38, 63-68 Ceron J.J., Eckersall P.D. & Martinez-Subiela S. (2005) Acute phase proteins in dogs and cats: current knowledge and future perspectives. Veterinary Clinical Pathology 34, 85-99 Child J.A., Cooper E.H., Illingworth S. & Worthy TS. (1978) Biological markers in Hodgkin's disease and non-Hodgkin's lymphoma. Recent Results in Cancer Research 64, 180-189 Dohoo I.R., Martin S.W. & Stryhn H. (2003) Veterinary Epidemiologic Research. AVC, Charlottetown, PEI, Canada.

    Dunn K.J., Herrtage M.E. & Dunn J.K. (1995) Use of ACTH stimulation test to monitor treatment of canine hyperadrenocorticism. Veterinary Record 137, 161-175 Eckersall PD., Duthie S., Safi S., Moffat D., HoradagodaN.U., Doyle S., Parton R., Bennet D. & FitzpatrickJ.L. (1999a) An automated biochemical assay for haptoglobin: prevention of interference from albumin. Comparative Haematology International 9, 117-124 Eckersall P.D., Duthie S., Toussaint J.M., Gruys E., Heegaard P., Alava M., Lipperheide C. & Madec F. (1999) Standardization of diagnostic assays for animal acute phase proteins. Advances in Veterinary Medicine 41, 643-655 Feldman E.C. & Nelson R.W. (2004) Canine hyperadrenocorticism (Cushing's syndrome). In: Canine and Feline Endocrinology and Reproduction. 3rd edn. Eds E.C. Feldman and R.W. Nelson. W.B. Saunders, St. Louis MO, USA. pp. 252-358 Fraser G.C. (1986) Analytical concepts. In: Interpretation of Clinical Chemistry Laboratorial Data. Blackwell Scientifi c, Edinburgh, UK. pp. 77-81 Greiner M., Pfeiffer D. & Smith R.D. (2000) Principles and practical application of the receiveroperating characteristic analysis for diagnostic tests. Preventive Veterinary Medicine 45, 23-41 Harvey J.W. & West C.L. (1987) Prednisolone-induced increases in serum alpha-2-globulin and Haptoglobin concentration in dogs. Veterinary Pathology 24, 90-92 Herrtage M.E. (2004) Canine hyperadrenocorticism. In: BSAVA Manual of Canine and Feline Endocrinol ogy. 3rd edn. Eds C.T. Mooney and M.E. Peterson. BSAVA, Gloucester, UK. pp. 150-171 Kaplan, L.A. & Pesce, A.J. (1996) Theory, analysis and correlation. In: Clinical Chemistry. 3rd edn. Mosby St Louis. pp. 521-674 Kobelt A.J., Hemsworth PH., Barnett J.L. & Butler K.L.

    (2003) Sources of sampling variation in saliva cortisol in dogs. Research in Veterinary Science 75, 157-161 Kushner I. & Mackiewicz A. (1987) Acute phase proteins as disease markers. Disease Markers 5, 1-11 Ling G.V, Stabenfeldt G.H., Comer K.M., Gribble D.H. & Schechter R.D. (1979) Canine hyperadrenocorticism: pretreatment clinical and laboratory evaluation of 117 cases. Journal of the American Veterinary

    Medicine Association 174, 1211-1214 Martinez-Subiela S. & Ceron J.J. (2005) Effects of hemolysis, lipemia, hyperbilirubinaemia, and anticoagulants in canine C-reactive protein, serum Amyloid A, and ceruloplasmin assays. Canadian Veterinary Journal 46, 625-629

    Martinez-Subiela S., Ginel PJ. & Ceron J.J. (2004) Effects of different glucocorticoid treatments on serum acute phase proteins in dogs. Veterinary Record 154, 814-817 McGrotty YL., Arteaga A., Knottenbelt C.M., Ramsey I.K. & Eckersall P.D. (2005) Haptoglobin concentrations in dogs undergoing trilostane treatment for hyper-adrenocorticism. Veterinary Clinical Pathology 43, 255-258

    McGrottyYL., Knottenbelt C.M., Ramsey I.K., Reid S.W.J. & Eckersall P.D. (2003) Haptoglobin concentrations in a canine hospital population. Veterinary Record 152,562-564 Meijer J.C. (1980) Canine hyperadrenocorticism. In: Current Veterinary Therapy. 7th edn. Ed R.W. KIRK. W.B. Saunders, Philadelphia PA, USA. pp. 975-979 Mischke R., Waterston M. & Eckersall PD. (2007) Changes in C-reactive protein and haptoglobin in dogs with lymphatic neoplasia. Veterinary Journal 174, 188-192 Neiger R., Ramsey I.K., O'Connor J., Hurley K.J. & Mooney C.T (2002) Trilostane treatment of 78 dogs with pituitary-dependent hyperadrenocorticism.

    Veterinary Record 150, 799-804 Neiger R. & Hurley K. (2001) 24 hour cortisol values ​​in dogs with Hyperadrenocorticism on trilostane. Proceedings of the 44th British Small Animal Veterinary Association Conference. Birmingham, UK. p. 549 Oliver J.W (2007) Steroid profi les in the diagnosis of canine adrenal disorders. 25th ACVIM Forum. 6 to 9 June, Seattle, WA, USA. pp. 471-473 Onishi T, Inokuma H., Ohno K., Soeda S., Noguchi K. & Sasaki K. (2000) C-reactive protein concentrations in normal and diseased dogs-measured by laser nephelometric immunoassay. Journal of Japanese Veterinary Medicine Association 53, 595-601 Perez-Alenza D., Arenas C., Lopez M.L. & Melian C. (2006) Long term effi cacy of trilostane administered twice daily in dogs with pituitary dependent hyperadrenocorticism. Journal of the American Animal Hospital Association 42, 269-276 Ruckstuhl N.S., Nett C.S. & Reusch C.E. (2002) Results of clinical examinations, laboratory tests, and ultrasonography in dogs with pituitarydependent hyperadrenocorticism treated with trilostane. American Journal of Veterinary Research 63, 506-510 Siebert-Ruckstuhl N.S., Boretti, FS., Wenger M., Maser-Gluth C. & Reusch C.E. (2006) Cortisol, aldosterone, cortisol precursor, androgen and endogenous ACTH concentrations in dogs with pituitary-dependant

    hyperadrenocorticism treated with trilostane. Domestic Animal Endocrinology 32, 63-75 Solter PF, Hoffmann WE., Hungerford L.L., Peterson M.E. & Dorner J.L. (1993) Assessment of corticosteroids-induced alkaline phosphatase isoenzyme as a screening test for hyperadrenocorticism in dogs. Journal of the American Animal Hospital Association 203, 534-538 Tecles F, Spiranelli E., Bonfanti U., Ceron J.J. & Paltrinieri S. (2005) Preliminary studies of serum acute-phase protein concentrations in haematologic and neoplastic diseases of the dog. Journal of Veterinary Internal Medicine 19, 865-870 Teske E., Rothuizen J., Debruijne J.J. & Rijnberk A. (1989) Corticosteroid-induced alkaline phosphatase isoenzyme in the diagnosis of canine hyperadrenocorti-cism. Veterinary Record 125, 12-14 Thomson, D., Milford-Ward, A. & Wicher, J. (1992) The value of acute phase measurements in clinical practice. Annuals of Clinical Biochemistry 29, 123-131 Vaessen M.A.R., Kooistra H.S., Mol J.A. & Rijnberk A.

    (2004) Urinary corticoid: creatinine ratios in healthy pet dogs after oral low-dose dexamethasone suppression test. Veterinary Record 155, 518-521 Wilson S.M. & Feldman E.C. (1992) Diagnostic value of steroid-induced isoenzyme of alkaline phosphatase in the dog. Journal of the American Animal Hospital Association 28, 245-250


    Завантажити оригінал статті:

    Завантажити