Область наук:

  • фундаментальна медицина

  • Рік видавництва: 2010


    Журнал: Сибірський онкологічний журнал


    Наукова стаття на тему 'АНАЛІЗ СТАТУСУ метилування ГЕНА пухлинних супресією ГЕНА RAR? 2 В циркулюють ДНК КРОВІ ПРИ РАКУ ЛЕГКОГО'

    Текст наукової роботи на тему «АНАЛІЗ СТАТУСУ метилування ГЕНА пухлинних супресією ГЕНА RAR? 2 В циркулюють ДНК КРОВІ ПРИ РАКУ ЛЕГКОГО»

    ?бронха методом локальної флуоресцентної в показниках АФ при раку, гострому запаленні

    спектроскопії виявило достовірні відмінності і нормальної слизовій оболонці.

    АНАЛІЗ СТАТУСУ метилування ГЕНА пухлинних супресією ГЕНА RARp2 В циркулюють ДНК КРОВІ ПРИ РАКУ ЛЕГКОГО

    А.А. ПОНОМАРЕВА1, Т.Е. СКВОРЦОВА2, А.Ю. ДОБРОДЕЕВ1

    НДІ онкології СО РАМН, м Томск1 Інститут хімічної біології і фундаментальної медицини СО РАН, Новосибірськ

    Актуальність. Рак легенів (РЛ) займає одне з провідних місць в структурі загальної летальності від онкологічних захворювань. Однією з умов успішного лікування РЛ є виявлення пухлинного процесу на ранніх стадіях. Відомо, що інактивація ряду генів пухлинної супресії в результаті аберантного гіперметілірованіе їх промоторних областей є одним з найбільш поширених і ранніх подій, що призводять до пухлинного переродження клітин. З високою частотою в пухлинної тканини при раку легкого виявлено Аберрантное метилювання гена RARP2 (в 80% випадків). Виявлення епігенетичних змін до циркулюючих ДНК (цірДНК) плазми / сироватки, ідентичних змін ДНК в клітинах пухлини (Fleischhacker M. et al .. 2007), відкриває великі можливості для розробки чутливих методів ранньої малоінвазивної діагностики раку легенів. Недавні дослідження показали, що використання цірДНК, пов'язаних з поверхнею формених елементів клітин крові в ПЛР, специфічною до метилированию (метПЦР), підвищує чутливість методу виявлення ДНК-онкомаркерів в порівнянні з використанням цірДНК плазми (Skvortsova T. et al., 2006; Kolesnikova E . et al., 2008).

    Мета дослідження - порівняльний аналіз в нормі і при раку легкого рівня метилування гена RARP2 в позаклітинних ДНК в різних фракціях крові методом кількісної метил-специфічною ПЛР в реальному часі.

    Матеріал і методи. В роботі використані зразки крові здорових індивідуумів і біль-

    2

    них рак легені. Кров поділяли на плазму і клітини крові, фракцію внДНК, пов'язаних з клітинної поверхнею, отримували послідовною обробкою клітин фосфатним буфером, що містить ЕДТА, і розчином трипсину. Рівень метилування гена пухлинної супресії RARP2 оцінювали методом ПЛР.

    Результати. Показано, що метиловані форми промоторів генів RARP2 можуть бути детектировать в 75-84% випадків в пухлинної тканини і плазмі крові у хворих на рак легені і в 23% випадків в тканини і плазмі крові у індивідуумів, що не виявляють симптомів розвитку онкозахворювань (Hsu HS et al ., 2007; Brait M. et al., 2009). В силу цього необхідною умовою створення методів аналізу, що дозволяють діагностувати рак, є не тільки якісна, але і кількісна оцінка рівня метилування промоторних областей генів в нормі і при розвитку злоякісних пухлин. Методом кількісної ПЛР нами показано, що рівень метилування гена RARP2 в цірДНК крові достовірно вище при раку легкого, ніж в нормі. При цьому кількість метилованих форм гена RARP2 в цірДНК в плазмі і цірДНК, пов'язаних з клітинної поверхнею, представлено в співвідношенні 1: 1.

    Висновки. Отримані дані свідчать про те, що визначення рівня метилування послідовностей генів пухлинної супресії в циркулюючих ДНК крові може бути використано для пошуку і верифікації нових діагностичних ДНК-маркерів, асоційованих з розвитком РЛ.

    Сибірський ОНКОЛОГІЧНИЙ ЖУРНАЛ. 2010. Додаток № 1


    Завантажити оригінал статті:

    Завантажити