Досліджено генетичну структуру стада корів айрширской породи СПГ «Сільце» на території Брянської області по генам каппа-казеїну, пролактину, соматотропіну, бета-лактоглобуліну, гипоталамического фактора транскрипції, пов'язаних з молочною продуктивністю. Відзначено високий рівень гомозиготизації і відсутність селекційно-цінних варіантів деяких генів.

Анотація наукової статті по агробіотехнології, автор наукової роботи - Дроздов Є. В., Заякін В. В., Нам І. Я.


Область наук:
  • Агробіотехнології
  • Рік видавництва: 2009
    Журнал: Вісник Брянського державного університету
    Наукова стаття на тему 'Аналіз поліморфізму генів каппа-казеїну,? -Лактоглобуліна, пролактину, ген рилізинг-фактора і соматотропіну по AluI і MspI маркерами у корів айрширской породи'

    Текст наукової роботи на тему «Аналіз поліморфізму генів каппа-казеїну,? -лактоглобуліна, пролактину, ген рилізинг-фактора і соматотропіну по AluI і MspI маркерами у корів айрширской породи»

    ?6. Сукачова В.Н. Методичні вказівки до вивчення типів лісу. М .: 1957. 114.с

    7. Спиридонов С.І., Алексахін Р.М., Фесенко С.В., Санжарова Н.І. Чорнобиль і навколишнє середовище // Радіаційна біологія і радіоекологія, 2007. Т.47, №2. С. 196-203.

    8. Федеральний закон «Про радіаційної безпеки населення» від 09. 01.1996, №3 Ф-3.11 // Відомості Верховної РФ, 1996.. № 11. С. тисячі триста шістьдесят два.

    9. Fesenko S.V., Vogit G., Spiridonov S.I. et al. // Radiat Enverion. Biophs. 2000. V.39. P.291-300.

    про авторів

    А. Д.Булохов -док. проф. Брянського державного університету ім. акдеміка І.Г. Петровського, Ця електронна адреса захищена від спам-ботів. Вам потрібно увімкнути JavaScript, щоб побачити її..

    Е. В. Борздико - канд. старий. препод. Брянського державного університету ім. академіка І.Г. Петровського, Ця електронна адреса захищена від спам-ботів. Вам потрібно увімкнути JavaScript, щоб побачити її.

    Н. Н. Панасенко - канд. старий. препо. Брянського державного університету ім академіка І.Г. Петровського, Ця електронна адреса захищена від спам-ботів. Вам потрібно увімкнути JavaScript, щоб побачити її..

    Н. А. Сковороднікова- канд. старий. преп. Брянського державного університету ім. академіка І.Г. , Kafbot2002 @ mail. ru

    УДК 575.113.2 + 575.17: 577.213 / 217: 636.2

    АНАЛІЗ поліморфізму генів каппа-казеїну, В-лактоглобулин, пролактину, ГЕН рилізинг-фактор І соматотропіну ПО АЬШ І М8Р1 маркер У КОРІВ айршірской ПОРОДИ.

    ЕВ. Дроздов, ВВ. Заякін, І.Я. нам

    Досліджено генетичну структуру стада корів айрширской породи СПГ «Сільце» на території Брянської області по генам каппа-казеїну, пролактину, соматотропіну, бета-лактоглобуліну, гипоталамического фактора транскрипції, пов'язаних з молочною продуктивністю. Відзначено високий рівень гомозіготіза-ції і відсутність селекційно-цінних варіантів деяких генів.

    Ключові слова: Аіршірская порода, каппа-казеїн, пролактин, соматотропін, бета-лактоглобулин, ги-поталаміческій фактор транскрипції, ПЛР-ПДРФ

    Починаючи з середини 60-х років XX століття в популяційних і еволюційних дослідженнях, а також в селекції все ширше стали використовувати дані про біохімічний поліморфізм білків. Пізніше прогрес в біотехнології і молекулярної генетики дозволив залучати відомості про мінливість безпосередньо молекул ДНК. Це дозволило виявити наявність різноманітних алельних варіантів, тобто поліморфізм генів і генотипів штучних і природних популяцій, - необхідна умова успішної селекції.

    Розвиток тваринництва на сучасному етапі неможливе без впровадження методів оцінки ознак продуктивності сільськогосподарських тварин, що базуються безпосередньо на аналізі спадкової інформації. Більшість господарсько-корисних ознак сільськогосподарських тварин відносяться до полігенних призна-кам. [1]

    Найбільш повно в молекулярно-генетичному аспекті вивчений велику рогату худобу. Більшість відомих на сьогодні маркерів продуктивності виявлено саме у ВРХ. Більшість цих маркерів пов'язані з показниками молочної продуктивності. Цей кількісний ознака детермінується великим числом генів, з різним інді-

    виділеного участю. Ці гени функціонально пов'язані в блоки локусів кількісних ознак ^ ТЬ). Різне поєднання алельних варіантів цих генів будуть по-різному визначати характеристики молочної продуктивності ВРХ. Для об'єктивної оцінки кількісних ознак слід враховувати поліморфний внесок багатьох генів QTL.

    Основними білковими компонентами молока є казеїни - 2,6%, бета-лактоглобулин - 0,3%. В ініціації і підтримці лактації беруть участь гормони пролактин і соматотропін. Інтенсивність їх експресії знаходиться під контролем клітин гіпоталамічної області, що виділяють стимулюючий рилізинг фактор -PIT-1. Активну участь цих генів у формуванні ознаки молочної продуктивності служить підставою для пошуку значущих асоціації їх поліморфних варіантів.

    Метою даної роботи є оцінка генофонду за поліморфними варіантами генів каппа-казеїну (CSN3), Р-лактоглобуліну (BLG), пролактину (PRL), гена рилізинг-фактора (PIT-1) і соматотропіну (GH) в стаді корів айрширской породи СПГ Сільце.

    МАТЕРІАЛИ ТА МЕТОДИ

    Дослідження проводилися на зразках ДНК, отриманих з крові корів айрширской породи (п = 50) СПГ Сільце. Як антикоагулянту використовували ЕДТА (0,5 М).

    З зразків крові виділяли ДНК стандартним методом [] з перерахунком обсягів розчинів на 500мкл цільної крові.

    У кожної корови визначали поліморфізм локусів впливають на молочну продуктивність: каппа-казеїну, P-лактоглобуліну (BLG), пролактину (РКЬ), гена рили-зинг-фактора (Р1Т-1) і соматотропіну ^ Н) по AluI і MspI маркерами.

    Для всіх локусів при вивченні поліморфізму ДНК був використаний метод по-лімеразой ланцюгової реакції з наступним рестрикційними аналізом продуктів ампліфікації (ПЛР-ПДРФ).

    Табл. 1. Послідовність праймерів і температура відпалу

    Маркер Послідовність праймера, 5'-3 'Температура відпалу, ° С Методика

    CSN3 TAT-CAT-TTA-TGG-CCA-TTG-GAC-CA CTT-CTT-TGA-TGT-CTC-CTT-AGA-GTT 56 Сулімова, 1991 [2]

    BLG CTA-TTG-TCC-TCG-TAGAGG-AAG-C A-AGA-AAG-CCC-TGG-ATA-AGC-AGC-C 62 Гладир, 2001 [3]

    PRL CGA-GTC-CTT-ATG-AGC-TTG-ATT-CTT GCC-TTC-CAG-AAG-TCG-TTT-GTT-TTC 59 Mitra A., 1995 [4]

    GH \ MspI CCC-ACG-GGC-AAG-AAT-GAG-GC TGA-GGA-ACT-GCA-GGG-GCC-CA 62 Mitra A., 1995 [4]

    GHAluI GCT-GCT-CCT-GAG-GGC-CCT-TCG GCG-GCG-GCA-CTT-CAT-GAC-CCT 59 Schlee, 1994 [5]

    PIT-1 CAA-TGAGAAAGTTGGTGC TCT-GCATTCGAGATGCTC 54 Moody, 1995 [6]

    Типування алелей генів проводили відповідно до оригінальних методиками авторами, зазначених в таблиці 1.

    Реакцію проводили в ампліфікаторі «Терцик» фірми «ДНК-технологія». ДНК денатурованого при 94 ° С протягом 4 хвилин, а потім проводили 35 циклів ампліфікації в наступному режимі: 94 ° С - 1 хв., Отжиг праймерів - 1хв., 72 ° С - 1 хв. Кінцевий етап синтезу проводили при 72 ° С протягом 4 хв. Температури відпалу праймерів вказані в таблиці 1.

    РЕЗУЛЬТАТИ

    Нами були визначені генотипи по аналізувати генам 50 корів айрширской породи СПГ Сільце.

    Аналіз поліморфізму аналізованих генів показаний на малюнку 1. На малюнку 1 показаний приклад електрофоретичного аналізу поліморфізму аналізованих генів.

    1 г "i

    I_CJ 1 + 1

    ! I I 'I-

    AA AB BB AB AA AB А В

    1-3 11

    Рис.1. Електрофоретичний аналіз продуктів рестрикції фрагментів досліджуваних генів: а - GH по MspI- маркера, б -PRL по RsaI-маркера, в - GH по Alu-маркера, г - PIT-1 по сайту рестрикції ен-донуклеази Hihfl, д - BLG по PvuII-

    У таблиці 2 представлені частоти генотипів аналізованих генів.

    У групі корів аіршірской породи очікувана гетерозиготність (Hex) по аналізованих генетичними маркерами в різному ступені перевищує значення спостережуваної (Hobs). Винятком є ​​маркер GH \ MspI. З цього маркера спостерігається невелике перевищення Hobs над Hex. Гомозиготизації по всіх аналізованих локусів відбувається нерівномірно, переважно по одному аллели, що ймовірно може привести зникнення другого алеля. Так, при аналізі поліморфізму гена пролактину аллель В пристосовувати тільки гетерозиготах (АВ - 0.125, ВВ - 0), а В-варіант гена каппа-казеїну що невиявлений. У літературних джерелах імаются повідомлення про різке зниження частоти В-алеля гена каппа-казеїну, а в ряді випадків повної його відсутності у інших порід великої рогатої худоби. [3,7,8]. При аналізі частот генотипів аналізованих генів в групі айршіского худоби, відзначається відповідність з результатами інших дослідників. Так в роботах [9, 10] наводяться наближені до наших значення частота генотипу ВВ пролактину в стадах чорно-рябої німецької та червоно-рябої. У деяких роботах відзначається повна відсутність (- / -) генотипу гена гормону росту і низька частота VV-генотипу по AluI-маркера. [9, 11, 12,]. Переважання генотипу ВВ локу-са PIT-1 зазначається в роботі [13], аллель В цього гена широко представлений в групах корів чорно-рябої породи в господарствах Польщі. [14]. Майже однакова зустрічальність алелей гена бета-лактоглобуліну відзначається в роботах [15, 16] Результати наших досліджень також показують тенденцію щодо зниження поліморфізму і зникнення деяких варіантів аналізованих генів.

    Табл.2. Генетична структура популяції корів айрширской породи СПГ Сільце по аналізованих генам.

    CSN3 BLG PRL GH \ MspI GH \ AluI PIT-1

    AA 1 AA 0.062 AA 0.875 + / + 0.68 LL 0.553 AA 0.113

    AB - AB 0.312 AB 0.125 +/- 0.297 LV 0.361 AB 0.227

    BB - BB 0.625 BB - - / - 0.02 VV 0.085 BB 0.659

    Hobs 0.312 0.0816 0.298 0.362 0.227

    Hex 0.348 0.115 0.282 0.390 0.351

    Серед виявлених сполучень алелів аналізованих генів, знайдено найбільш часто зустрічаючи комбінація- CSN3 - АА, PRL - AA, BLG - BB, GH \ MspI - +/-, GH \ AluI -LL, PIT-1-BB. Всі інші поєднання зустрічалися рідше, деякі були поодинокі.

    There was investigated the genetic structure of the of Aurshire breed cows herd at Bryansk region. to the of genes quantitative attributes connected with milk productivity. There was appear that of selective valuable allele variants for к-casein, prolactin, growth-gormone, PIT-1 has low content in investigated herd.

    The key word: Aurshire breed, к-casein, prolactin, growth-gormone, в-lactoglobulin, pituitary transcription factor 1 (PIT-1)

    Список літератури

    1. Зінов'єва Н.А. Проблеми біотехнології і селекції сільськогосподарських тварин. Дубровиці, ВИЖ, 2006, 342с.

    2. Сулімова Г.Є., Шайхана Г.О. Берберів Е.М. та ін Генотипування локусу каппа-казеїну у великої рогатої худоби за допомогою полімеразної ланцюгової реакції // Генетика. 1991. т.27. №12. С. 2053-2062

    3. Гладир Е. А. ДНК-діагностіеа варіантів генів каппа-казеїну і беталактоглобуліна у великої рогатої худоби // Автореф. дис. канд. біол. наук, Дубровиці, ВИЖ, 2001..

    4. Mitra A., Schlee P., Balakrishnan C.R. et al. Polimorphism at growth hormone and prolactin loci in Indian cattle and buffalo // J. Anim. Breed. Genet. 1995. V. 112.P.71-74.

    5. Schlee P., Graml R., et al. Influence of growth hormone genotypes on breed-ing values ​​of Simmental bulls // J. Anim. Breed. Genet. 1994a. 111. P. 253-256.

    6. Moody D.E., Pomp D., Barendse W. Restriction fragment length polymorphism in amplification products of the bovine Pit-1 gene and assignment of Pit-1 to bovine chromosome 1 // J. Animal Genetics. 1995. 26. 45-47

    7. Журавель О.В., Глазко В.І. Поліморфізм за локусом к-казеїну молока у різних порід великої рогатої худоби // Сільськогосподарська біологія. 1999. № 2. 120-124

    8. Костюніна О.В. // Автореферат дис. канд. біол. наук, Дубровиці. ВИЖ, 2004, 22 с.

    9. Хатамі С.Р. ДНК-поліморфізм генів пролактину і гормону росту у ярославської і чорно-рябої породи великої рогатої худоби // Автореф. дис. канд. біол. наук, Москва, 2004.

    10. Аліпанов Массуд. Господарсько-корисні ознаки корів з різними генотипами каппа-казеїну і пролактину // Автореф. дис. канд. біол. наук, Москва, 2006.

    11. Luci M.C., Hauser S.D., Eppard P.J., Krivi G.G., Bauman D.E., Variants of somatotropin in cattle: gene frequencies in major dairy breeds and associated milk production // Domestic Animal Endocrinology - 1993 - 10, 325 - 333 /

    12. Dybus A. Association of growth hormone (GH) and prolactin (PRL) genes polymorphisms with milk production traits in Polish Black-and-White cattle // J. Animal Science Papers and Reports. 2002. V. 20. 203-212

    13. Cosier V. et al., Research concerning the genetic structure of Romanian simental and maramures brown breeds at the pituitary transcription factor locus // Lucrari §tiintifice Zootehnie §i Biotehnologii. 2008. V. 41 (1). 45-49

    14. Dybus A. et all. PIT1-HinfI gene polymorphism and its associations with milk production traits in polish Black-and-White cattle // Arch. Tierz., Dummerstorf / 2004. V 6. 557-563

    15. Усенбеков Е.С. Автореферат дис. канд. біол. наук, Санкт-Петербург -Пушкін, 1995, 17с.

    16. Graml R., Buchberger J., Klostermeyer H., Pirchner F. Untersuchungen uber die Genfrequenzen der Caseine und? -Lactoglobuline bei der bayerischen Braunviehpopulation // Zuchtungskunde. 1984. 56, (4) S. 221-230.

    про авторів

    Е.В. Дроздов- аспірант Брянського державного університету ім. академіка І.Г. Петровського, Ця електронна адреса захищена від спам-ботів. Вам потрібно увімкнути JavaScript, щоб побачити її..

    В.В Заякін. - док., Проф. Брянського державного університету ім. академіка І.Г. Петровського, Ця електронна адреса захищена від спам-ботів. Вам потрібно увімкнути JavaScript, щоб побачити її..

    І Я. Нам - док. проф. Брянського державного університету ім. академіка І.Г. Петровського, Ця електронна адреса захищена від спам-ботів. Вам потрібно увімкнути JavaScript, щоб побачити її..

    УДК 581.1: 631.584.5

    ВПЛИВ бульбочкових бактерій

    НА одновидові І ЗМІШАНІ ПОСІВИ люпин ЯЧМЕНЮ

    А.С. Кононов, І.В. Білоус, Б.А. Петрушин

    Були встановлені переваги рослин люпину і ячменю оброблених штамом 363 а в змішаних посівах в порівнянні з контрольними посівами без обробки. Встановлено посилення в змішаних посівах ростових процесів, інтенсивності трансп-рації, інтенсивності фотосинтезу, вмісту хлорофілу, ППФ, які тісно взаємопов'язані між собою.

    Ключові слова: змішані посіви, зростання, хлорофіл, люпин, ячмінь, інтенсивність транспірації.

    Одна з багатьох завдань фізіології рослин - знаходження шляхів ефективного підвищення продуктивності сільськогосподарських культур, що дозволяє при вдалому результаті вирішити ряд продовольчих і технічних проблем. Існує кілька варіантів вирішення цієї проблеми. В даному випадку нами були проведені дослідження над одночас-довимі посівами люпину, змішаними посівами люпину і ячменю без обробки, а також змішаними посівами люпину і ячменю, обробленого штамом бульбочкових бактерій.

    Мета досліджень - вивчити вплив бульбочкових бактерій на одновидових і змішані посіви люпину і ячменю.

    Методика досліджень. Польові дослідження проводилися на дослідному полі БГУ в 2009 році. Об'єктами досліджень були одновидових посівах люпину, змішаний посів люпину і ячменю без обробки, змішаний посів люпину і ячменю, оброблений штамом 363 а. Для проведення досліджень дослідні зразки були висаджені на трьох варіантах в п'ятикратної повторності. Ширина ділянки 1 метр, довжина 2.5 метра.

    Ріст рослин визначається методом вимірювання висоти стебла з точністю до одного знака після коми. Для цього в будь-якому вигляді береться випадкова вибірка 10 рослин і вимірюється їх висота до верхнього листа. Вимірювання проводяться в два терміни. Інтервал проведення вимірювань становить 5 днів. Середньодобовий приріст визначається як різницею між останнім виміром висоти рослин і першим. Інтенсивність транспірації рослин визначалася ваговим методом. Визначення інтенсивності фотосинтезу проводили


    Ключові слова: АІРШІРСКАЯ ПОРОДА / Каппа-КАЗЕЇН / пролактин / соматотропіну / Бета-лактоглобулин / Гіпоталамічному ФАКТОР ТРАНСКРИПЦІЇ / ПЛР-ПДРФ

    Завантажити оригінал статті:

    Завантажити