Резюме Вивчено поліморфізм 4 генів, включаючи гени лужноїфосфатази (ALPL), розчинної кислої фосфатази (ACPI), рецептора ліпопротеїну низької щільності (LDLR) і вітамін Д-связиваюшим білка (GC), продукти яких, можливо, беруть участь в процесах мінералізаііі скелета, у жінок в постменопаузі з осгеопорозом (ОП) і без нього. Проведено оцінку розподілу частот генотипів і алелей серед досліджуваної і контрольної груп жінок. Вивчено потенційна зв'язок їх генотипів з мінеральною щільністю кісткової тканини (МЩКТ), яка вимірюється за допомогою подвійного енергетичної рентгенівської абсорціометріі. Виявлена ​​достовірна асоціація МЩКТ шийки стегна з генотипами SS і 2F GC гена у жінок з ОП (0,606 ± 0,010 і 0,654 ± 0,020 гр / см2 відповідно, р

Анотація наукової статті з фундаментальної медицини, автор наукової роботи - Крилов М. Ю., Мякоткін В. А., Беневоленская Л. І.


Analysis of alkaline phosphatase, soluble acid phosphatase, low density lipoprotein and vitamin D binding protein gene polymorphisms as possible gene-candidates participating in mineral bone density determination in women with primary osteoporosis in postmenopause

Objective. To investigate the distribution of alkaline phosphatase (ALPL), acid phosphatase I (ACPI), receptor lipoprotein low density (LDLR) and vitamin D binding protein (GC) genotypes in osteoporotic ana nonosteoporotic postmenopausal women and the possible associations these genotypes with bone mineral density (BMD). Material and methods. In this study ALPL, ACPI, LDLR and GC genotypes were determined by polymerase chain reaction (PCR) or PCR-RFLP analysis. Results. We observed significant the associations between BMD of the femoral neck and SS and 2F GC genotypes (0.696 ± 0.010 and 0.654 ± 0.020 gr / cm 2, p


Область наук:

  • фундаментальна медицина

  • Рік видавництва: 2004


    Журнал: Науково-практична ревматологія


    Наукова стаття на тему 'Аналіз поліморфізмів генів лужноїфосфатази. Розчинної кислої фосфатази, ліпопротеїну низької щільності і вітамін d зв'язуючого білка як можливих генів-кандидатів, що беруть участь в детермінації мінеральної щільності кістки у жінок з первинним остеопорозом в постменопаузі '

    Текст наукової роботи на тему «Аналіз поліморфізмів генів лужноїфосфатази. Розчинної кислої фосфатази, ліпопротеїну низької щільності і вітамін d зв'язуючого білка як можливих генів-кандидатів, що беруть участь в детермінації мінеральної щільності кістки у жінок з первинним остеопорозом в постменопаузі »

    ?АНАЛІЗ поліморфізму генів лужноїфосфатази, розчинні кислої фосфатази, Рецептор ліпопротеїнів низької щільності І ВІТАМІН Д зв'язуючого білка ЯК МОЖЛИВИХ ГЕНОВ - КАНДИДАТІВ, БЕРУТЬ УЧАСТЬ У детермінації МІНЕРАЛЬНОЇ ЩІЛЬНОСТІ КІСТКИ У ЖІНОК В ПОСТМЕНОПАУЗЕ З первинного остеопороза

    М.Ю.Крилов, В.Л.Мякоткін, Л.І.Беневоленская ГУ Інститут ревматології РАМН, Москва

    резюме

    Вивчено поліморфізм 4 генів, включаючи гени лужноїфосфатази (АЬРЬ), розчинної кислої фосфатази (АСР1), рецептора ліпопротеїну низької щільності (1.01.1 *) і вітамін Д-свя-зиваюшего білка (ОС), продукти яких, можливо, беруть участь в процесах мінералізації скелета, у женшин в постменопаузі з остеопорозом (ОГ!) і без нього. Проведено оцінку розподілу частот генотипів і алелей серед досліджуваної і контрольної груп жінок.

    Вивчено потенційна зв'язок їх генотипів з мінеральною щільністю кісткової тканини (МЩКТ), яка вимірюється за допомогою подвійного енергетичної рентгенівської абсорціометріі. Виявлена ​​достовірна асоціація МП КТ шийки стегна з генотипами 58 і ОС гена у жінок з ОП (0,606 ± 0,010 і 0,654 ± 0,020 гр / см2 відповідно,

    р < 0,05). Чи не виявлено асоціацій МЩКТ з трінуклеогідним повтором гена AL.PL,

    Агв! 0501у поліморфізмом гена АСР1 і дінуклеотідних повтором гена ЬЕЬК. Отримані дані підтверджують важливу роль генотипів гена ОС в детермінації МЩКТ шийки стегна серед жінок в постменопаузі з первинним ОП.

    Ключові слова: остеопороз, гени-кандидати, мінеральна щільність кістки

    Остеопороз (ОП) - хронічне системне захворювання скелета, що характеризується зниженням мінеральної щільності кісткової тканини (МЩКТ) та мікроструктурною перебудовою кісткової тканини, що призводить в кінцевому рахунку до зростаючої крихкості кісток і високому ризику їх переломів. Головною причиною виникнення переломів є .

    Серед великого числа генів-кандидатів, які можуть впливати на МЩКТ, найбільш добре вивчений ген рецептора вітаміну Д. Вітамін Д є одним з попередників кальцій регулюючих гормонів організму, що забезпечують всмоктування кальцію в кишечнику і його реабсорбцію в нирках [1]. Перенесення активних метаболітів вітаміну Д до відповідних клітинних рецепторів здійснюється вітамін Д зв'язує білком, ген якого (ОС) володіє вираженим поліморфізмом.

    Показано, що розподіл генетичних варіантів ВС білка в різних популяціях пояснюється дією природного відбору і підтверджується функціональними відмінностями фенотипів ОС білка в фіксації і транспортуванні похідних вітаміну Д [2]. Один з них - каль-

    Адреса: 115522 Москва, Каширське ш., 34а

    ДУ Інститут ревматології РАМН.

    Тел. 114-4478 Факс: 114-4478

    цітріол [1,25 (0Н) 203) | відіграє важливу роль в утворенні і диференціювання остеокластів з їх попередників

    - клітин гемопоетичного ряду. Через остеобласти він стимулює активність остеокластів. Найбільший вплив кальцитриол надає на диференціювання остеобластів, модулюючи в них експресію деяких генів, включаючи колаген 1 типу, кісткову лужну фосфатазу, остео-понтнн, остеокапьцін [3,4], - маркерів ремоделювання кісткової тканини. У зв'язку з цим значний резонанс викликало дослідження, проведене М., Оеуою е! а1. | 51, які виявили зчеплення МЩКТ з 1р36, 2р24-23 і 4я локусами в 7 великих сім'ях, використовуючи традиційний метод пар сиб-сов. Відомо, що в 4я локусе розташований ген ЗС бел-ка, в локусі 2р - знаходиться ген розчинної кислої фосфатази I (АСР1), в локусі 1р - ген лужноїфосфатази печінки (ALPL), що дало нам підставу припустити їх можливу участь у детермінації МЩКТ.

    Згідно з даними літератури, одним з найбільш інформативних біохімічних маркерів резорбції кісткової тканини є тартрат-резистентна кисла фосфатаза (ТРКФ), кодується геном АСР5.

    Внаслідок нестійкості і незначної кількості в сироватці крові ТРКФ її вивчення пов'язано з певними труднощами. Крім того, в даний час поліморфізм АСР5 гена не відомий. Обійти це утруднення можливо з помошио вивчення поліморфізму тісно сіеп-

    ленного з ним гена рецептора ліпопротеїну низької щільності (ЬОЯЬ), фланкирующего ген АСР5.

    Це дослідження зроблено з метою вивчення зв'язку генотипических варіантів ряду нових кандидат-них генів А1_РЦАСР1, ЬЕЬЯ і ВС, які можуть брати участь в остеогенезі кісткової тканини.

    матеріали та методи

    У дослідження були включені 2 групи жінок, що пройшли денситометрическое дослідження в Центрі профілактики остеопорозу ГУ Інституту ревматології РАМН. Одну з них склали жінки з встановленим діагнозом ОП у віці від 56 до 79 років (середній вік 71,0 ± 6,2 г). У різних серіях дослідів число досліджених жінок з ОП коливалося від 48 до 82 чол. Іншу групу - контролю або порівняння склали жінки в тому ж віковому інтервалі (середній вік 69,0 ± 5,6 г), які не мали ОП, число яких в різних дослідах коливалося від 37 до 60 чол. МЩКТ (в г / см2) поперекового відділу И -1.4 хребта і шийки стегнової кістки вимірювалася за допомогою подвійної енергетичної рентгенівської абсорб-ціометріі на апараті З>ОЯ 4500 (Але ^ с). Діагноз ОП ставилося з використанням критеріїв ВООЗ (1994).

    Поліморфізм гена AL.PL був вивчений у 60 хворих ОП і 39 контрольних осіб, поліморфізм гена АСР1 - у 48 хворих ОП і у 37 осіб групи порівняння.

    Поліморфізм гена ЬОЬЯ, пов'язаний з СА-дінукпео-тідним повтором, був вивчений у 82 жінок з ОП і у 60 жінок групи порівняння. Поліморфізм ОС гена був вивчений у 70 жінок з ОП і у 51 жінки з групи контролю.

    Геномна ДНК була виділена з крові обстежених осіб стандартним методом сольовий екстракції [6).

    Гснотіпнровамне АЬРЬ гена

    Для вивчення поліморфізму ALPL гена, пов'язаного з тринуклеотидних повтором, 0,05 - 0,1 мкг геномної ДНК були амлліфіііровани в 20 мкл ПЛР буферного розчину. Як праймерів були використані наступні олігонуклеотиди; 5'-АООАТТСТО-ОСАОАСАОСАА-3 'як прямий праймер і 5'-СААСТСССТСТССААТСАТС-3'

    - як зворотний. Ампліфікація була проведена протягом 30 циклів з наступними параметрами: початкова денатурація - 94'С - 3 хв., Наступна - 94'С - I хв., Отжиг

    - 60 ° С - 1,5 хв., Добудова - 72 ° С - I хв. і остаточна добудова - 72 ° С - 5 хв. в ампліфікаторі МС2 (фірма ДНК-Тсхнологія, Росія). Продукт ампліфікації ALPL гена, що містить фрагмент ДНК розміром 148 пар основ (п.о.), піддавали вертикальному електрофорез в 8% поліакриламідному гелі і фарбували етідіумброміду.

    Генотшшрованіс АСР1 гена

    Для аналізу поліморфізму гена АСР1. пов'язаного з точковой заміною (Аг?>С1п) в 105 кодоні, використовували відповідні праймери: 5'-ССТСССААС-

    ТАСТТСАА! 1 ПАС С-3 '- як прямий праймер і 5 "-ОСАТСПТСАСААСАСССТАССАС-З' - як зворотний.

    ПЛР проводили згідно з умовами, описаним вище. Отриманий продукт, розміром 149 п.о., піддавали обробці Тад1 ендонуклеази (фірма МВ1 Регтетая, Литовська Республіка) та потім електрофорез в 3% агарозному гелі. Відсутність сайту рестрикції відповідало аллелю АСР1 * В, а наявність - аллелю АСР1 * А.

    Генотііірованіе ЬОЬЯ гена

    Для вивчення поліморфізму LDLR гена, пов'язаного з СА дінуклеотідних повтором, 0,05 - 0,1 мкг геномної ДНК були ампліфікувати в 20 мкл ПЛР буферного розчину. Як праймерів були використані наступні олігонуклеотиди: 5 '-

    САСТТТСТАТАТТССТТСАААСТСТ-З '- як прямого праймера і 5'-САСТСААСАААТ-АСАССААССАСОО-З' - як зворотний. Ампліфікація була проведена протягом 30 циклів з тими ж па-

    параметром, що були використані для ампліфікації ALPL гена. Продукт ампліфікації дінуклеотідних повтору LDLR гена містив фрагмент ДНК розміром 112 п.о., який піддавали вертикальному електрофорез в 8% поліакриламідному гелі і фарбували етідіумброміду.

    Генотіліроваміе СС гена

    Поліморфізм 11 екзонів СС гена, що кодує вітамін О-транспортний білок, був вивчений за допомогою ДНК типування, описаного в роботі А.Вгаіп з співавт. [7], в нашій модифікації і вперше застосованого в вітчизняних дослідженнях. Як праймерів були використані олігонуклеотиди, фланкирующие 416 і 420 кодони нуклеотидноїпослідовності 11 екзонів ОС гена: 5-ГГ Г ГГСАСАСГСОСАСАССОАС-З '- як прямого праймера і 5'-ААСАССАССТСАСТТТАТС-ОААС-З' - як зворотний. П ЦР була здійснена протягом 30 циклів згідно параметрам, викладеним вище. Частина отриманого продукту ампліфікації розміром 126 п.о. піддавали обробці рестриктазой Есо1301 (аналог рестріктази 51у1), а іншу - рестриктазой ВхіЮ (аналог рестріктази наїсися) [фірми МВ1 Регтепію, Литовська республіка). Продукти рестрикції аналізували за допомогою вертикального електрофорезу в 8% полі-ак-ріламідном гелі з подальшим фарбуванням сріблом.

    Статистичні методи

    Відмінності в розподілі частот генотипів визначали за допомогою методу хі квадрат, застосовуючи в разі необхідності поправку Єйтса, або точний критерій Фішера. Відмінності в середніх значеннях МЩКТ позооночні-ка і стегна визначали за допомогою критерію Стиодента. значення р < 0,05 вважалося статистично значущим.

    Результати та обговорення

    Одним з маркерів утворення кісткової тканини є кісткова лужна фосфатаза (ЛФ), яка розщеплює органічний фосфор до неорганічного, збільшує продукцію фосфату кальцію і бере участь в мінералізації кісткової тканини [8,9]. У нормі в сироватці присутні три основних ізоформи ЛФ: печінкова, кісткова та ниркова. Пече-нічних і кістковий варіанти ЛФ кодуються поліморфним геном ALPL, локалізованим в локусі IрЗб. 1 -34. Тканинні відмінності обох ферментів пов'язані з модифікаціями, що відбуваються на пост-трансляційному рівні. У АЬРЬ гені виявлено кілька поліморфізмів, що розрізняються своєю різноманітністю. Найбільш виражений з них пов'язаний з тринуклеотидних повтором в С2 екзоні, який був вивчений в цьому дослідженні.

    Частотна характеристика генотипів і алелей АЬРЬ гена серед хворих на первинний постменопаузальним ОП і жінок контрольної групи представлена ​​в табл. 1. Як видно з наведених даних, характер розподілу генотипів серед хворих ОП значимо не відрізнявся від такого в контрольній групі (хі-квадрат = 0.37, р = 0,83). Також не виявлено відмінностей в частоті алелей 133 п.о. і 148 п.о. в двох порівнюваних групах.

    Аналіз показників МЩКТ хребта і шийки стегна в залежності від генотипу гена АЬРЬ не показав їх достовірних відмінностей, як серед хворих, так і осіб групи контролю (табл. 2).

    Таким чином, на підставі отриманих даних можна зробити висновок, що вивчений поліморфізм гена ALPL не є інформативним маркером остеогенеза і не пов'язаний з ризиком схильності до ОП.

    Аналіз розподілу частот генотипів і частот алелей поліморфізму гена АСР1, пов'язаного з ARGI05GLN заміною, серед хворих ОП і жінок групи порівняння (табл. 3) не виявив достовірних відмінностей в частотах генотипів і алелей між двома вивченими вибірками (хі-квадрат = 0,71, р = 0,7). У хворих ОП простежується тен-

    Таблиця I

    РОЗПОДІЛ ЧАСТОТ генотипів і алелей гену лужноїфосфатази печінки (АЬРЬ) СЕРЕД ХВОРИХ ПЕРВИННИМ ОП ТА ОСІБ ГРУПИ КОНТРОЛЮ

    ГенАЬРЬ Хворі ОП п = 52 (%) Контрольна група n = 39 (%)

    Генотипи (в.о.)

    133.133 16 (30,8) 10 (25,6)

    133.148 26 (50,0) 20 (51,3)

    148.148 10 (19,2) 9 (23,1)

    аллели

    133.133 58 (55,8) 40 (51,3)

    148.148 46 (44.2) 38 (48,7)

    За активністю фенотип АСР1 розподіляються наступним чином: З > В > А. Частота алеля А зменшується з півночі на південь і корелює зі зменшенням частоти ОП по тим самим вектором.

    Аналіз середніх показників МП КТ хребта та шийки стегна в залежності від носійства певних генотипів АСР1 гена серед хворих ОП і в групі порівняння (табл. 4) не виявив достовірних відмінностей в МЩКТ вивчених відділів кісткової системи в залежності від АСР1 генотипу в обох групах жінок. Таким чином, вивчення поліморфізму АСР1 гена не встановило асоціацій досліджених генотипів зі схильністю до ОП і з генетичної детерминацией процесів мінералізації кісткової тканини.

    Найбільш адекватним маркером резорбції кісткової тканини є концентрація ТРКФ, який кодується геном АСР5, однак відсутність поліморфізму в цьому гені унеможливлює його вивчення на молекулярному рівні. Певним виходом з даного скрутного становища може бути вивчення поліморфізмів

    Таблиця 2

    РОЗПОДІЛ СЕРЕДНІХ ПОКАЗНИКІВ МЩКТ (М ± ВОК) * ХРЕБТА (твердженням.)

    І ШИЙКИ СТЕГНА (Ш.Б.) ЗАЛЕЖНО ВІД ГЕНОТИПУ ГЕНА лужноїфосфатази АЬРЬ У ХВОРИХ НА ПЕРВИННИМ ОП І В КОНТРОЛЬНОЇ ГРУППЕ

    ГенотіпАЬРЬ Хворі ОП (п = 60) Контрольна група (n = 39)

    МЩКТ твердженням. (Гр / см2) МЩКТ Ш.Б. (Гр / см2) МЩКТ твердженням. (Гр / см2) МЩКТ Ш.Б. (Гр / см2)

    133.133 0,725 ± 0,025 0,595 ± 0,016 1,052 ± 0.030 0,826 ± 0,020

    133.148 0,720 ± 0,018 0,610 ± 0,015 1,029 ± 0.020 0,831 ± 0,010

    148.148 0,722 ± 0,026 0,633 ± 0,022 1,077 ± 0.030 0.848 ± 0,020

    * М ± СОС - середня ± стандартна помилка середньої

    денция зниження частоти генотипу АА і накопичення генотипу ВВ в порівнянні з жінками контрольної групи.

    Встановлено, що одним з показників активності процесів резорбції кісткової тканини є концентрація КФ, особливо ТРКФ. В даний час описано 5 ізоформ КФ: розчинна еритроцитарна (ген ACPI), кісткова або тартрат-резистентна (ген АСР5), тромбоцитарная, селезеночная і простатична. Високі концентрації КФ можуть гальмувати процес костеобра-тання, що сприяє відносному посилення процесів резорбції. J.Dissing and H.Johnsen [10] надали докази молекулярних відмінностей 3 основних алелей ACPI серед європеоїдів ACPI * А, АСР1 * В і АСР1 * С, які утворюють 6 фенотипів (А, В, С, АВ, АС і ВС). Ген ACPI розташований на 2 хромосомі в локусі Р25. Кодують області ACPI * В і АСР1 * С алелей ідентичні і розрізняються лише на білковому рівні. Фенотип А відрізняється від фенотипу В єдиною заміною в 105 кодоні (аргінін - »гліцин), яка і визначає поліморфізм цього гена.

    Таблиця 3

    РОЗПОДІЛ ЧАСТОТ генотипів і алелей гену розчинні кислої фосфатази (АСР1) СЕРЕД ХВОРИХ ПЕРВИННИМ ОП ТА ОСІБ ГРУПИ КОНТРОЛЮ

    Ген ACPI Хворі ОП Контрольна

    п = 48 (%) група 1) = 37 (%)

    Генотипи 7 (14,6) 8 (21,6)

    АА 21 (43,7) 15 (40,5)

    АВ 20 (41,7) 14 (37,8)

    ВВ

    аллели

    А 35 (36,4) 31 (41,9)

    У 61 (63,6) 43 (58,1)

    Таблиця 4

    РОЗПОДІЛ СЕРЕДНІХ ПОКАЗНИКІВ МЩКТ (М ± ВОК) 'ХРЕБТА (твердженням.)

    І ШИЙКИ СТЕГНА (Ш.Б.) ЗАЛЕЖНО ВІД ГЕНОТИПУ ГЕНА АСР1 У ЖІНОК З ОП І В КОНТРОЛЬНОЇ ГРУППЕ

    Генотип ACPI Хворі ОП (п = 60) Контрольна група (n = 39)

    МЩКТ твердженням. (Гр / см2) МЩКТ Ш.Б. (Гр / см2) МЩКТ твердженням. (Гр / см2) МЩКТ Ш.Б. (Гр / см2)

    АА 0,753 ± 0,030 0,641 ± 0,020 1,027 ± 0,030 0,840 ± 0,020

    АВ 0,706 ± 0,020 0,607 ± 0,010 1,031 ± 0,010 0,824 ± 0,010

    ВВ 0.723 ± 0,020 0.630 ± 0,010 1,080 ± 0,030 0,842 ± 0,010

    * М ± СОС - середня ± стандартна помилка середньої

    Таблиця 5

    РОЗПОДІЛ ЧАСТОТ генотипів і алелей гену ШЬІ СЕРЕД ХВОРИХ ПЕРВИННИМ ОП І ЖІНОК ГРУПИ КОНТРОЛЮ

    * М ± СОС - середня ± стандартна помилка середньої

    генів, розташованих поблизу гена АСР5. Одним з них є ген ЬЕЬЯ, поліморфізм якого пов'язаний з СА-дінуклеотідних повтором. Аналіз зазначеного поліморфізму, на нашу думку, може допомогти в оцінці значущості АСР5 гена для прогнозування виникнення ОП. У таблиці 5 наведені частотні характеристики генотипів і алелей гена ЬРЬЯ в основній і контрольній групах досліджених жінок. Як видно з таблиці, серед хворих ОП відзначається майже 2-х кратний дефіцит генотипу 106/108 п.о. в порівнянні з контролем (011 = 0,51), що може вказувати на менший ризик розвитку ОП для носіїв даного генотипу в порівнянні з іншими генотипами. Однак цей показник не досягає 95% рівня значущості, в цілому розподіл генотипів та алелей гена ЬОШ. в основній і контрольній групах статистичною достовірністю не відрізнялося (хі-квадрат = 1,8 при 4 <З.Г, р = 0,7). Не було виявлено значних відмінностей в середніх показниках МП КТ в обох вивчених областях кост-

    ного скелета в двох групах постменопаузі жінок в залежності від ЬОЯЬ генотипів (табл. 6).

    Розподіл частот генотипів і алелей ОС гена серед жінок в постменопаузі з первинним ОП і серед жінок адекватного віку контрольної групи (табл. 7) показало наявність флуктуації по частотах певних генотипів. Зокрема, серед жінок з ОП виявлено накопичення генотипів РР і 2Б і дефіцит генотипу 2.2 в порівнянні з контрольною групою.

    Однак за всіма генотипам розподіл частот в порівнюваних групах статистично значимо не відрізнялися (хі-квадрат = 2, бЗ при 5 с1.Г, р = 0,76). Аналіз середніх показників МЩКТ хребта і стегна в залежності від генотипу ОС гена в тих же група жінок (табл. 8) встановив, що найбільш низькі значення МЩКТ хребта відзначаються серед носіїв генотипу РР як серед здорових осіб, так і хворих ОП. Ця закономірність практично зберігається і для МЩКТ шийки стегна. при

    Таблиця 7

    РОЗПОДІЛ ЧАСТОТ генотипів і алелей гену ВІТАМІН Д ТРАНСПОРТНОГО БЕЛКА (СС) СЕРЕД ЖІНОК З ПЕРВИННИМ ОП І ГРУПИ КОНТРОЛЮ

    Ген СС Хворі ОП Контрольна

    п = 70 (%) група п = 51 (%)

    генотипи

    РР 5 (7,1) 2 (3,9)

    12 (17,1) 9 (17,7)

    2.2 2 (2,8) 3 (5,9)

    РБ 16 (22,8) 16 (31,4)

    2Б 25 (35,7) 14 (27,4)

    2Р Ю (14,3) 7 (13,7)

    аллели

    Р 36 (25,7) 27 (26,5)

    в 65 (46,4) 48 (47,0)

    2 39 (27,9) 27 (26,5)

    Ген LDLR Хворі ОП Контрольна

    п = 82 (%) група п = 60 (%)

    Генотипи (в.о.)

    106.106 34 (41.5) 26 (43,3)

    106.108 6 (7.3) 8 (13,3)

    106.112 31 (37.8) 19 (3.7)

    108.112 6 (7,3) 4 (6,7)

    112.112 5 (6,1) 3 (5,0)

    аллели

    106 105 (64,0) 79 (65,8)

    108 12 (7,3) 12 (Ю.О)

    112 47 (28,6) 29 (24.2)

    Таблиця 6

    РОЗПОДІЛ СЕРЕДНІХ ПОКАЗНИКІВ МЩКТ (М ± ВОК) * ХРЕБТА І ШИЙКИ СТЕГНА ЗАЛЕЖНО ВІД ГЕНОТИПУ ГЕНА РЕЦЕПТОРА ЬЦИ *

    У ЖІНОК З ПЕРВИННИМ ОП ТА ОСІБ ГРУПИ ПОРІВНЯННЯ

    Генотип ЬОІЛ * Хворі ОП (п = 82) Контрольна група (n = 60)

    МЩКТ твердженням. (Гр / ем2) МЩКТ Ш.Б. (Гр / см2) МЩКТ твердженням. (Гр / см2) МЩКТ Ш.Б. (Гр / ем2)

    106.106 0,727 ± 0,014 0,619 ± 0,016 1,012 ± 0,016 0,828 ± 0.013

    106.108 0,713 ± 0,050 0,616 ± 0,025 1,053 ± 0,037 0.837 ± 0,016

    106.112 0,722 ± 0,018 0,612 ± 0,011 1,063 ± 0,029 0.851 ± 0,022

    108.112 0,747 ± 0,024 0,616 ± 0,034 0,996 ± 0,035 0.805 ± 0,007

    112.112 0,726 ± 0,015 0,667 ± 0,038 1,099 ± 0,042 0.814 ± 0,011

    Таблиця 6 '

    РОЗПОДІЛ СЕРЕДНІХ ПОКАЗНИКІВ МЩКТ (М ± ВОК)

    ЗАЛЕЖНО ВІД ГЕНОТИПУ ЗС ГЕНА У ЖІНОК З ПЕРВИННИМ ОП ТА ОСІБ ГРУПИ КОНТРОЛЮ

    ГенотіпАЬРЬ Хворі ОП (п = 70) Контрольна група (n = 51)

    МЩКТ твердженням. (Гр / см2) МЩКТ Ш.Б. (Гр / см2) МЩКТ твердженням. (Гр / см2) МЩКТ Ш.Б. (Гр / см2)

    FF 0.672 ± 0.020 0.618 ± 0.020 1.052 ± 0.030 0.826 ± 0.020

    SS 0.757 ± 0.030 0.606 ± 0.010 * 1.029 ± 0.020 0.831 ± 0.010

    2.2 0.748 ± 0.002 0.585 ± 0.010 1.077 ± 0.030 0.848 ± 0.020

    FS 0.674 ± 0.020 0.614 ± 0.020 1.032 ± 0.020 0.837 ± 0.010

    2S 0.726 ± 0.020 0.630 ± 0.010 1.037 ± 0.030 0.816 ± 0.010

    2F 0.739 ± 0.030 0.654 ± 0.020 * 1.045 ± 0.030 0.865 ± 0.040

    # М ± СОС - середня ± стандартна помилка середньої * р з 0,05 генотип БЗ проти генотипу 2Р

    цьому відмінності в МП КТ були отримані тільки в групі жінок з ОП. Найбільше значення МЩКТ шийки стегна було знайдено у хворих з генотипом 2Р і найменше у хворих з генотипом (55 0,654 ± 0,0! І 0,606 ± 0,01 г / см2 відповідно, р < 0,05).

    Аналіз показників МЩКТ поперекового відділу хребта серед жінок з ОП виявив асоціацію з ББ і Р5 генотипами ЗС гена. Хворі з генотипом ББ мали вищу МЩКТ хребта в порівнянні з хворими, що мають генотип РБ (0,755 ± 0,033 і 0,674 ± 0,018 г / см2 відповідно, р = 0,056), проте показник достовірності в цьому випадку не досягав 95% рівня значущості. Можна припустити, що ББ, 2я і РБ генотипи мають певні функціональні відмінності у фіксації і транспортуванні активних метаболітів вітаміну Д. За-

    лучанин для гена ОС попередні результати потребують подальшого підтвердження на більш великих вибірках жінок з ОП і, можливо, відкриють нові перспективи подальшого використання нового ЗС маркера для вивчення схильності до цього захворювання. Дані про зв'язок генотипів гена, що кодує вітамін Д транспортний білок з показниками МЩКТ, отримані нами вперше, разом з уже відомими поліморфізму гена рецептора вітаміну Д (Рок1, ​​ВВШ !, Ара1 і Тая1) доцільно враховувати як додаткові фактори ризику при скринінгу населення з метою виявлення осіб, схильних до ОП.

    Робота мала фінансову підтримку РФФД, грант N 00-04-49340

    ЛІТЕРАТУРА

    1. Hausslcr M.R., Whitfield G.K., Haussler С.А. et al. The nuclear vitamin D receptor: Biological and molecular regulatory properties revealed. J. Bone Miner. Res., 1998, 3, 325- 339.

    2. Coppenhaver D., Knappers F., Schidlow D. et al. Serum concentrations of Vitamin D-binding Protein (Group-Specific Component) in Cystic Fibrosis. Hum. Genet., 1981, 4, 339-403.

    3. Шварц Г.Я. Вітамін D. D-гормон і альфакальцідол: молекулярно-біологічні та фармакологічні аспекти дії. Остеопороз, остеопо., 1998, 3, 2-6.

    4. Martin TJ. and Dempster D.W. Bone structure and cellu-laractivity. In: Osteoporosis, edited by J.C. Stevenson and R. Lindsay. Chapman & HallMedical. London, 1998, 1-28.

    5. Devoto М., Shimoya K., Caminis J. et al. First-stage autosomal genome screen in extended pedigrees suggest genes predisposing to low bone mineral density on chromosomes Ip, 2p and 4q. Europ. J. Hum. Genet., 1998, 6, 151-157.

    6. Miller S.A., Dykes D.D., Polesky H.F. A simple salting out procedure for extracting DNA from human nucleated cells. Nucleic Acids Res., 1988,16, 12-15.

    7. Braun A., Bichlmaier R., Cleve H. Molecular analysis of

    the gene for the human vitamin D-binding protein (group-specific componept): allelic differences of the common genetic GC types. Hum. Genet. 1992,89,401-406.

    8. Calvo M.S., Eyre D.R., Gundberg C.M. Molecular basis and clinical application of biological markers of bone turnover. Endocrine Rev. 1996,17 (4), 333-363.

    9. Ericsen E.F., Brixen K., Charles P. New markers of bone

    metabolism: clinical use in bone disease. Europ. J. Endocrinol., 1995, 132, 251-263.

    10. Dissing J., Johnsen H.H., Sensabaugh G.F. Human red cell

    acid phosphatase (ACPI): the amino acid sequence of the

    two isozymes Bf and Bs encoded by the ACPI * B allele. J. Biol. Chem. 1991 року, 226, 20619-20625.

    надійшла I7J2.03

    Abstract

    M. Yu. Krylov, V.A. Myakotkin, LI.Benemlenskaya

    Analysis of alkaline phosphatase, soluble acid phosphatase, low density lipoprotein and vitamin D binding protein gene polymorphisms as possible gene-candidates participating in mineral bone density determination in women with primary osteoporosis in postmenopause

    Objective. To investigate the distribution of alkaline phosphatase (ALPL), acid phosphatase I (ACPI), receptor lipoprotein low density (LDLR) and vitamin D binding protein (GC) genotypes in osteoporotic ana nonosteoporotic postmenopausal women and the possible associations these genotypes with bone mineral density (BMD).

    Material and methods. In this study ALPL, ACPI, LDLR and GC genotypes were determined by polymerase chain reaction (PCR) or PCR-RFLP analysis.

    Results. We observed significant the associations between BMD of the femoral neck and SS and 2F GC genotypes (0.696 ± 0.010 and 0.654 ± 0.020 gr / cm2, p < 0.05) but not with lumbar spine in the osteoporotic women. The associations were not observed between ALPL, ACPI, LDLR genotypes and BMD.

    Conclusion. These new data showed important role of the GC gene in determination of bone mineral density of the femoral neck in postmenopausal women with osteoporosis.

    Key words: osteoporosis, gene-candidates, bone mineral density


    Ключові слова: ОСТЕОПОРОЕ /Гени-КАНДИДАТИ /Мінеральна Щільність КІСТКИ /OSTEOPOROSIS /GENE-CANDIDATES /BONE MINERAL DENSITY

    Завантажити оригінал статті:

    Завантажити