Вивчено здатність лектинів з насіння деяких сортів олійних рослин селекції ВНІІМК викликати аглютинацію еритроцитів 2-ї групи крові людини. Визначено ряд таких показників, як активність лектинів, кількість сирих лектинів і специфічність лектинів.

Анотація наукової статті по агробіотехнології, автор наукової роботи - Альошин В. Н., Лобанов В. Г., Мінакова А. Д.


Область наук:
  • Агробіотехнології
  • Рік видавництва: 2009
    Журнал: Известия вищих навчальних закладів. Харчова технологія
    Наукова стаття на тему 'Активність лектинів деяких олійних рослин селекції ВНІІМК'

    Текст наукової роботи на тему «Активність лектинів деяких олійних рослин селекції ВНІІМК»

    ?633.85: 577.112.853

    АКТИВНІСТЬ лектинів ДЕЯКИХ ОЛІЙНИХ РОСЛИН СЕЛЕКЦИИ ВНІІМК

    КН. АЛЬОШИН, В. Г. ЛОБАНОВ, АТ. Мінакова

    Кубанський державний технологічний університет,

    350072, м Краснодар, вул. Московська, 2; електронна пошта: ас1т (@ кя1і.кіЬап.гі

    Вивчено здатність лектинів з насіння деяких сортів олійних рослин селекції ВНІІМК викликати аглютинацію еритроцитів 2-ї групи крові людини. Визначено ряд таких показників, як активність лектинів, кількіст -ство сирих лектинів і специфічність лектинів.

    Ключові слова: лектини, специфічність лектинів, олійні рослини, аглютинація еритроцитів.

    Лектини - гетерогенна група білків неімунной природи, що володіють властивістю можна зупинити і вибірково зв'язувати цукру і їх залишки, не викликаючи хімічного перетворення На цій властивості заснована здатність лектинів агглютинировать еритроцити і преципітувати складні вуглеводи [1, 2].

    Присутність активних лектинів в шроті, що отримується в процесі вилучення олії з насіння олійних рослин, в деяких випадках ускладнює харчове і кормове використання цього високобілкового продукту.

    Як відомо, деякі лектини виявляють специфічність до еритроцитів певної групи крові, викликаючи тільки їх аглютинацію. Інші лектини, в тому числі лектини сої та рицини, однаково взаємодіють з еритроцитами всіх груп крові. Крім того, деякі лектини характеризуються специфічністю до певних вуглеводів і їх залишків. Відомо, що при взаємодії з вуглеводами активність лектинів може бути знижена аж до повного придушення. При цьому, при наявності специфічності до певного вуглеводів, зниження активності лектинів відбувається тільки при взаємодії з цим углеводом [2].

    Мета нашого дослідження - визначення активності лектинів в насінні деяких сортів олійних рослин селекції ВНІІМК (Краснодар): соняшнику сортів Лакомка та Фаворит, сої сортів Альба і Віла, ріпаку сорту Метеор, суріпиці сорту Злата, рицини сортів Білоріченська і Кришталева 66.

    Про активність лектинів судили по реакції аглютинації еритроцитів людини 2-ї групи крові. В якості препаратів лектинів використовували сирі екстракти білків, витягнуті буферно-сольовим розчином (Ма-фосфатний буфер 0,01 М, що містить 0,15 М №С1) з подрібненого насіння. При цьому насіння соняшнику і рицини були завалені вручну, для дослідження використовувалися ядра насіння; насіння сої, ріпаку та суріпиці були подрібнені без обрушення У разі сої зміст №С1 в буферно-сольовому

    розчині було збільшено до 0,35 М, так як концентрація 0,15 М була недостатньою для повного вилучення лектинів сої. Екстракти піддавалися послідовним дворазовим разведениям в лунках плексигласу планшети в обсязі 0,4 мл на буферно-сольовому розчині з подальшим додаванням 2% - й суспензії еритроцитів (1: 1). Рівень гемагглютинирующей активності оцінювався візуально після інкубації протягом 1 год при 25 ° С і був виражений у вигляді титру ге-магглютінаціі (Гаї / мл), під яким розуміється величина найбільшого розведення препарату, все ще дає чітко виражену аглютинацію (табл. 1). Визначення титру гемаглютинації супроводжувалося негативним контролем на відсутність спонтанної аглютинації еритроцитів [3].

    Таблиця 1

    Зразок Титр 1, Гаї / мл Специфічна активність, Гаї / мг білка Активність сирих ЛЕКТА-нів, мкг / мл

    Соняшник Лакомка Агглютинация відсутня - -

    Соняшник

    Фаворит » - -

    Ріпак Метеор » - -

    Суріпиця Злата » - -

    Соя Альба 128 3,89 256,84

    Соя Віла 64 1,85 541,09

    рицина

    Білоріченська 1024 267,43 3,75

    рицина

    Кришталева 66 1024 290,83 3,44

    В ході дослідження встановлено, що лектини з насіння соняшнику, ріпаку та суріпиці не викликають аглютинації еритроцитів 2-ї групи крові людини. Титр гемаглютинації для препаратів сирих лектинів сої сортів Альба і Віла склав відповідно 128 і 64 Гаї / мл, а рицини сортів Білоріченська і Кришталева 66 - 1024 Гаї / мл.

    Таблиця 2

    Зразок Зміст білкового азоту на а. с. в., мг / г Зміст сирих лектинів (N | 6,25) на а. с. в., мг / г

    Соя Альба 45,35 283,44

    Соя Віла 49,48 309,25

    Рицина Білоріченська 10,77 67,31

    Рицина Кришталева 66 10,01 62,56

    Таблиця 3

    Вихідна Активність лектинів після добав-

    актив лення 0,05 М вуглеводу, титр- ,

    Зразок ність, Гаї / мл

    титр-1, D-га-D-лак - D-глю- D-ман-

    Гаї / мл лактоза тоза до за але за

    Агглю-

    Соя Альба 128 тінація отсут- ствует - 128 128

    Соя Віла 64 »Агглю - 64 64

    рицина тінація

    Білоріченська 1024 128 отсут- ствует 1024 1024

    рицина

    Кришталева 66 1024 128 »1024 1024

    У білкових екстрактах з насіння сої і ядер рицини було визначено вміст білка, що дозволило розрахувати такий показник, як специфічна активність лектинів (Гаї / мг білка), що дозволяє одночасно враховувати активність лектинів і їх кількість; а також встановити мінімальну концентрацію білка (сирих лектинів), що викликає аглютинацію еритроцитів (табл. 1). Як видно з отриманих даних, специфічна активність лектинів рицини значно перевершує таку у лектинів сої, і кількість білка, необхідне для гемагглюті-нації, набагато менше. Слід зазначити, що два досліджених нами сорти рицини виявилися досить близькі за активністю лектинів, тоді як сорт сої Альба володіє більш активними лектинами, ніж сорт Віла.

    При визначенні кількості білка спочатку було встановлено зміст білкового азоту в буферно-сольових екстрактах з подрібненого насіння сої та ядер рицини за методом Кьельдаля згідно [4]. Потім отриманий результат був помножений на коефіцієнт 6,25 (табл. 2).

    Було виявлено, що зміст сирих лектинів в екстрактах з насіння сої досліджених сортів в цілому

    помітно перевершує їх вміст в екстрактах з насіння рицини.

    Для підтвердження наявності лектинів в екстрактах з досліджуваних насіння паралельно з реакцією аглютинації еритроцитів проводилася реакція гальмування гемаглютинації різними моносахаридами: .D-галактозою, D-глюкозою, D-маноза, а також D-лактозою - для пригнічення лектинів рицини (табл. 3). При цьому готувалися послідовні дворазові розведення препаратів лектинів в лунках плексигласу планшети на буферно-сольовому розчині, що містить 0,05 М вуглеводу, після чого планшет інкубували протягом 30 хв при 25 ° С. Потім в лунки додавалася 2% -а суспензія еритроцитів, як було описано вище.

    Отримані дані показують, що лектини сої специфічні до D-галактози: додавання 0,05 М цього моносахарида повністю пригнічує їх активність. У той же час додавання D-глюкози і D-манози не впливає на активність лектинів сої.

    Активність лектинів рицини відзначено зниження до -бавленіем D-галактози і, навіть більшою мірою, D-лактози; додавання D-глюкози і D-манози не впливає на активність лектинів рицини. З огляду на, що лактоза побудована із залишків b-D-галактози і D-глюкози, можна говорити про специфічність лектинів рицини саме до b-D-галактози, що відповідає літературним даним [1, 2].

    Таким чином, встановлено, що лектини з насіння соняшнику сортів Лакомка та Фаворит, ріпаку сорту Метеор і суріпиці сорту Злата не викликають аглютинації еритроцитів 2-ї групи крові людини. Була визначена активність лектинів сої сортів Альба і Віла і рицини сортів Білоріченська і Кришталева 66, а також підтверджена здатність деяких вуглеводів пригнічувати їх активність.

    ЛІТЕРАТУРА

    1. Goldstein I., Hayes C. // Advances in carbohydrate chemistry and biochemistry, v. 35, N. Y., 1978, p. 127-340.

    2. Луцик М.Д., Панасюк Е.Н., Луцик А.Д. Лектини. -Львів, 1981. - 256 с.

    3. Методи дослідження в імунології / Под ред. І. Леф-ковітса, Б. Перніс. - М .: Світ, 1981. - С. 399 ^ 00.

    4. ГОСТ 26889-86. Продукти харчові та смакові. Загальні вказівки з визначення вмісту азоту методом Кьельда-ля. - М., 1987.

    Надійшла 26.09.08 р.

    ACTIVITY OF LECTINS FROM SOME OIL-BEARING PLANTS OF VNIIMK SELECTION

    V.N. ALESHIN, V.G. LOBANOV, A D. MINAKOVA

    Kuban State Technological University,

    2, Moskovskaya st., Krasnodar, 350072; e-mail: Ця електронна адреса захищена від спам-ботів. Вам потрібно увімкнути JavaScript, щоб побачити її.

    The ability of lectins from some oil-bearing plants of VNIIMK selection to cause agglutination of human blood group A erythrocytes is studied. A number of characteristics, such as activity of lectins, content of crude lectins and specificity of lectins, were determined.

    Key words: lectins, lectins specificity, oil-bearing plants, erythrocyte agglutination.

    664.34: 633.853.52

    АЛЬТЕРНАТИВНИЙ СПОСІБ ЗНИЖЕННЯ токсичності насіння рицини

    Е.А. Ольховатов, ЕВ. ЩЕРБАКОВА

    Кубанський державний аграрний університет,

    350044, м Краснодар, вул. Калініна, 13; факс: (861) 221-58-05, електронна пошта: olhovatov e@тЬох.ги,

    scherbakovaev @ mail. ги

    Проведено огляд існуючих традиційних способів детоксикації білкової частини продуктів переробки насіння рицини, розглянуті недоліки цих способів переробки для виробництва високобілковою кормової добавки. Експериментально обґрунтовано новий альтернативний незначними витратами спосіб зниження токсичності насіння рицини методом регульованого самозігрівання, що дозволяє зменшити зниження поживної цінності рицинової шроту в порівнянні з відомою технологією.

    Ключові слова: насіння рицини, рицини шрот, касторове масло, відносна біологічна цінність білка, токсичність, регульоване самосогревание насіння.

    В умовах зростаючого дефіциту кормового білка при виборі технологічних схем і режимів переробки насіння рицини особливої ​​актуальності набуває завдання вироблення знешкоджених шроту з високою протеїнової цінністю. При цьому якість основного продукту переробки насіння рицини -касторового масла - не повинно погіршуватися.

    Білки насіння рицини, потенційно будучи повноцінним кормовим продуктом, містять ряд ан-тіпітательних і токсичних компонентів, що знижують їх кормову цінність. З цієї причини макухи та шроти, отримані при переробці насіння рицини, піддають тепловій денатурації, яка знижує їх кормову цінність.

    Переваги рицинової шроту як білкового компонента кормової суміші:

    високий вміст сирого протеїну - до 40-45%; досить повноцінний набір незамінних амінокислот;

    високий вміст амінокислоти лізину - від 3 до 5%, аргініну - до 9%, гліцину - до 8,6%.

    При виробленні рицинової шроту як кормового продукту необхідна інактивація антиживильних речовин, присутніх в насінні рицини: лек-тинів - агглютинина і токсину; алергену, що має білково-полісахаридних природу; алкалоїду рицинин [1, 2].

    Мета дослідження - розробка способу зниження кількості антиживильних речовин в насінні рицини з отриманням високобілкового кормового

    шроту з високою відносною біологічною цінністю (ОБЦ).

    Конкретні завдання дослідження - вивчення можливості зниження кількості антиживильних речовин насіння рицини при післязбиральної обробки, обгрунтування оптимальних параметрів інактивації антиживильних речовин насіння і рицинової шроту з метою отримання високоякісного кормового продукту.

    Лабораторні дослідження проводили на сорто -смесі плодів і насіння рицини. Відбір проб плодів і насіння і визначення кислотного числа (КЧ) касторової олії вели відповідно до рекомендацій ВНИИЖ [3]. При дослідженні білкового компонента ядро ​​насіння вручну відокремлювали від насіннєвої оболонки, подрібнювали на лабораторному млині і знежирювали гексаном шляхом багаторазового настоювання при 4 ° С. Після відділення гексана визначали ОБЦ мікрометодом з використанням інфузорії Tetгahymena pyгifoгmis, а загальну токсичність витягнутого знежиреного білка насіння визначали біотестуванням на інфузорії Stylonychia ту ^ 1 та&'[4].

    При виконанні досліджень керувалися гіпотезою про схожість біохімічних процесів, про-

    Таблиця 1

    Тривалість процесу самозігрівання ОБЦ,%

    Без самозігрівання (контроль) 64

    1 добу 82

    2 добу 128


    Завантажити оригінал статті:

    Завантажити